Inhibice enzymové aktivity cytochromů P450 endokrinním disruptorem 17α-ethinylestradiolem

Abstract

17α-ethinylestradiol (EE2) is a synthetic hormone, derivative of the natural hormone estradiol. EE2 is one of the the most prescribed drugs in the world. It belongs to the estrogenic endocrine disrupter chemicals. These compounds are able to alter functions of the endocrine system and cause adverse effects in the organism, offspring and (sub)population. In this thesis, there are observed effects of 17α-ethinylestradiol on enzyme activities of main enzymes involved in phase I of xenobiotic biotransformation, i.e. cytochromes P450 (CYP), in vitro. Isoforms of CYP subfamilies 1A, 2B, 2C, 2E and 3A were studied in rats and humans. Each CYP isoform was incubated with EE2 at two concentrations, 10μM EE2 and the concentration corresponding to the substrate concentration in the specific marker reactions of individual CYP isoforms. The results indicate, that in rat liver microsomes the activity of all studied isoforms except CYP1A2 was decreased in the presence of EE2. When EE2 was added to the incubation mixture at the concentration of the reaction substrate, the greatest decrease in enzyme activity was observed for CYP2C6, with the remaining activity only 36%. In human liver microsomes, the activity of CYP2B6, CYP2C9, CYP2E1 and CYP3A4 was also effected by EE2. As in the case of rat model, CYP2C subfamily...

17α-ethinylestradiol (EE2), který patří mezi nejvíce předepisovaná léčiva, je syntetický hormon odvozený od tělu přirozeného hormonu 17β-estradiolu. Řadí se mezi estrogenní endokrinní disruptory, tedy látky, které jsou schopné měnit funkce endokrinního systému a způsobovat nežádoucí účinky v organismu i jeho potomstvu. V této diplomové práci byl sledován vliv EE2 na enzymové aktivity hlavních enzymů I. fáze biotransformace xenobiotik, cytochromů P450 (CYP), in vitro. V potkaním organismu byly studovány isoformy 1A1, 2B1/2, 2C6, 2C11, 2E1 a 3A1/2. V lidském organismu byly studovány isoformy 1A1, 1A2, 2B6, 2C9, 2E1 a 3A4. Každá isoforma CYP byla inkubována s EE2 o dvou koncentracích, s 10μM EE2 a koncentrací EE2, která byla stejná jako koncentrace substrátu ve specifické markerové reakci CYP. Výsledky ukázaly, že v potkaních jaterních mikrosomech byla v přítomnosti EE2 snížena aktivita všech studovaných isoforem cytochromů P450 kromě isoformy CYP1A2. Nejvíce byla vlivem EE2 o koncentraci rovné koncentraci substrátu inhibována isoforma CYP2C6, jejíž aktivita byla snížena na 36%. V lidských jaterních mikrosomech došlo v přítomnosti EE2 k poklesu aktivity u isoforem CYP2B6, CYP2C9, CYP2E1 a CYP3A4. Nejvíce byla, stejně jako...