Kapalinová chromatografie s hmotnostně-spektrometrickou detekcí na bázi mikrofluidního čipu

Abstract

This diploma thesis deals with hyphenation of liquid chromatography with mass spectrometric detection based on microfluidic chip. Firstly, a miniaturized ion source for atmospheric-pressure chemical ionization (APCI), and atmospheric-pressure photoionization (APPI) was constructed. The main component of this source was a glass microfluidic chip. Geometry and the working conditions of the chip were optimized. Since both ion sources work under the same conditions, possible advantages resulting from APCI/APPI combination were investigated. Furthermore, the performance characteristics of the sources were evaluated, and compared to the conventional high flow-rate sources. The best performing source, APCI, was then hyphenated with HPLC using low flow-rate. A method for separation of fatty acids methyl esters using Supelco 37 standard was developed. The separation conditions were as follows: C18 reversed stationary phase, and acetonitrile containing 0.1 % formic acids was used as the mobile phase. A temperature gradient was used in order to enhance the speed of the separation. The limits of detection and quantitation of for selected analytes using the chip micro-APCI were calculated, and compared to the ones obtained using a commercially available micro-APCI source. The method was used for separation of...

Tato diplomová práce se zabývá spojením kapalinové chromatografie s hmotnostně- spektrometrickou detekcí na bázi mikrofluidního čipu. Nejprve byl sestaven miniaturizovaný iontový zdroj pro chemickou ionizaci za atmosférického tlaku (APCI) a fotoionizaci za atmosférického tlaku (APPI), jehož hlavní komponentou byl skleněný mikrofluidní čip. Byla optimalizována geometrie a pracovní podmínky zdrojů. Jelikož oba iontové zdroje pracují za stejných podmínek, byly testovány možné výhody kombinovaného zdroje APCI/APPI. Dále byly studovány vlastnosti zdrojů a následně byly porovnávány s konvenčními zdroji pracujícími za vysokých průtoků. Zdroj, který vykazoval nejlepší vlastnosti, tedy APCI, byl spojen s kapalinovou chromatografií za nízkého průtoku. Byla vyvinuta metoda pro separaci methylesterů mastných kyselin pomocí standardu Supelco 37 Component FAME Mix. K separaci bylo využito reverzní chromatografie na stacionární fázi C18 a mobilní fázi obsahující 0,1 % kyseliny mravenčí v acetonitrilu. Pro zrychlení doby analýzy byl použit teplotní gradient. Byl určen limit detekce a limit stanovitelnosti čipového mikro-APCI zdroje a byl porovnán s detekcí pomocí komerčního zdroje v režimu mikro-APCI. Vyvinutá metoda byla použita k separaci methylesterů mastných kyselin ve vzorcích jojobového oleje a oleje z...