Myofibrilární organizace PCr/CK systému v kosterním svalu
Organization of myofibrillar PCr/CK system in skeletal muscle
dizertační práce (OBHÁJENO)
Zobrazit/ otevřít
Trvalý odkaz
http://hdl.handle.net/20.500.11956/95940Identifikátory
SIS: 112332
Kolekce
- Kvalifikační práce [20052]
Autor
Vedoucí práce
Oponent práce
Nováková, Olga
Neckář, Jan
Fakulta / součást
Přírodovědecká fakulta
Obor
-
Katedra / ústav / klinika
Katedra fyziologie
Datum obhajoby
19. 6. 2007
Nakladatel
Univerzita Karlova, Přírodovědecká fakultaJazyk
Čeština
Známka
Prospěl
4. METODY Izolaceapermeabilizacesvalovýchvlriken Izolacemyofibril Měřeni spoťebykyslíku Spojeneenzymatickéanalýzyprostarroveni:ATP. ADP, PCr, keďin, laktiÍ, pyruvátaspeciÍickéCK aktivity Stanoveníobsahuproteirrůaanorganickéhotbsfiítu Spcifické fluoresceněníznačeníCK mo|ekuly Elektrotbreťckéděleníproteinů(SDS.PAGE) DetekceproteinůstříbremaCBB KonfoMhí mikroskopie Elektronovámikoskopie FLIP metodaprodetekcipohybufluorescenčněznačenýchmolekul 5'soUHRNvÝslpprÚ výsledky disertačníprácejsou obsaženyve ětyřecbnásledujícíchčláncíclrkteréjsou pub|ikovrírrynebopňjatyk publikaciv ďbomých ěasopisechs IF. (t) Lcvelsof energy.rs|atedmetebo|itesin intacÍandisolrtedperfused-superfusedrat ske|eta|musc|es1Štettetal. t9ll; Práce zavedla metody měření metabolitůPCr/CK systémua kvantifikovala energďicloj'stavkostemíhosvalupotkana:i) izolovanéhopomocímetody,,freezec|amping.. ii) po vasku|ámíizolaci iii) po regeneraci,současněperÍirndovanéboa supeďundovného médiem'Hladinarnakoergrrichfosfátův anoxiii poperfusipoklesl4 avšakkreatinovynáboj [PCt]{[PCr]+[cr]) dosrihl stejnéhodrroý u perfundované|ro.superfundovalréhosvalu váledem ke konEole (,freezec|ampeď.).Konstantníkeatinový nríbojindíkujezachování rovnováŽnéhoellergetickéhostavu u izolovaného perfundovaného-superťundovného m.sacilis. (2)' Creatinc kinase reaction in skinned rat...
5. SUMMARYOFRESULTES Áll resultshavebeenpublishedor acceptedin joumalswith IF. Ite list of publicďionis enclosedin thechaoter6. 1) Lcvcls of cneigr-rclated metabolitcsin intect and isolated pcrfuscd-supcrfused rrt ske|ctálmusc|e*(ŠteÍleta],1991) AdenosineS'.triphosphate(ATP), phosphocreatine(PCr), creatirre(Cr), ínorganicphosphate (Pi),lactate(LAC), pyruvate(PYR) andglycogenasglucose(GLU) weredeterminedandfree adenosineS'-diphosptrate(ADP) was calculatedtom ATP:creatinephosphokinase(CPK) reactionin the gracilis muscleof cold.acc|imatedrďs in vivo. and in completelyisoIated mrsc|esundermediumperfusionandzuperfusionínvito, rsing thefreeze-clampingmetlrcd. Themeanin vivo leve|s(pmoVgw.w.)were:ATP 4.8'PCr 12.0.Cr 7,8'Pi ló.l' LAc l.6' PYR 0.09,GLU 22.9,ADP 0,62x t0-3.[solationof the muscle(about11min of anox'a fo|lowedby perfision irrthe air with a highpo2 Inedium)decreasedmacroergicphosphďe levels(ATP 3.0.PCr 8.3).Inisolatedmusclesperfusedwitha highpO2medium(99kPaOz, perflrion rate70 pl/mitt)andsimultaneouslysupeďusedwitha low po2medium(ó.2kPao2' 2.3mVmin)at28oC in vitrothelevelsof metaboliteswere(pmoUgw.w.):ATP 3.1,PCr 8.5, Cr 5.ó.Pi 9'2, |Ac 2.|' PYR 0.l9. GLU 6.6'ADP 0.44x l0(.]).Themeansteadyoxygen upuke of the íso|atedmusclewas 97 nmol 02 x min.l x g.l w.w. Ttrus.thelevelsof macroergicphosphatesand their...