Enzymové modifikace biologicky aktivních flavonoidů
Enzymatic modifications of bioactive flavonoids
diploma thesis (DEFENDED)
View/ Open
Permanent link
http://hdl.handle.net/20.500.11956/85535Identifiers
Study Information System: 169529
Collections
- Kvalifikační práce [19109]
Author
Advisor
Consultant
Křen, Vladimír
Valentová, Kateřina
Referee
Wimmer, Zdeněk
Faculty / Institute
Faculty of Science
Discipline
Clinical and Toxicological Analysis
Department
Department of Physical and Macromolecular Chemistry
Date of defense
5. 6. 2017
Publisher
Univerzita Karlova, Přírodovědecká fakultaLanguage
Czech
Grade
Excellent
Keywords (Czech)
flavonoid, antioxidant, metabolity, biotransformaceKeywords (English)
flavonoid, antioxidant, metabolites, biotransformationExtrakt z ostropestřce mariánského (Silybum marianum (L.) Gaertn., synonymum Carduus marianus L., Asteraceae) silymarin obsahuje mimo jiné složky především bioaktivní flavonolignany. Ty mají hepatoprotektivní a antioxidační účinky a rovněž protirakovinnou, chemoprotektivní, dermatoprotektivní a hypocholesterolemickou aktivitu. Tato práce se zaměřuje na přípravu metabolitů druhé fáze biotransformace neprozkoumaných flavonolignanů 2,3-dehydrosilybinu (DHSB), silychristinu (SCH), 2,3-dehydrosilychristinu (DHSCH). Čisté sulfatované deriváty byly připraveny za použití aryl sulfotransferasy z Desulfitobacterium hafniense. Jako donor sulfátu byl použit p- nitrofenyl sulfát (p-NPS). Flavonolignany tvoří monosulfáty výhradně na pozici C-20 (v případě silychristinu a 2,3-dehydrosilychristinu na pozici C-19), s výjimkou 2,3-dehydrosilybinu, který také tvoří 7,20-O-disulfatované deriváty. U všech vzorků byly provedeny antioxidační testy - zhášení DPPH radikálu (nejvyšší aktivitu měl 2,3-dehydrosilychristin sulfát: IC50=7,87 µM), redukce Folin- Ciocalteauova činidla (nejaktivnější byl 2,3-dehydrosilychristin: 1,58 ekvivalentů gallové kyseliny), zhášení ABTS+ radikálu (nejvyšší aktivita naměřena u silychristinu: 1,50 ekvivalentů vitaminu C), inhibice peroxidace lipidů (nejvyšší aktivitu měl 2,3- dehydrosilybin:...
Extract from milk thistle (Silybum marianum (L.) Gaertn., synonym Carduus marianus L., Asteraceae) silymarin contains among others primarily bioactive flavonolignans. They have hepatoprotective and antioxidative effects and also anticancer, chemoprotective, dermatoprotective and hypocholesterolemic activity. This thesis focuses on the preparation of metabolites of the second phase of biotransformation unexplored flavonolignans 2,3-dehydrosilybin (DHSB), silychristin (SCH), 2,3-dehydrosilychristin (DHSCH). Pure sulfated derivatives were prepared using aryl sulfotransferase from Desulfitobacterium hafniense and p-nitrophenyl sulfate (p- NPS) as a donor. Flavonolignans yield exclusively monosulfates at the position C- 20 (C-19 in the case of silychristin and 2,3-dehydrosilychristin), except for 2,3- dehydrosilybin that gives also the 7,20-disulfated derivatives. For all samples were made antioxidant tests - DPPH assay (the highest activity had 2,3-dehydrosilychristin sulfate: IC50= 7,87 µM), Folin-Ciocalteau reduction assay (the highest activity had 2,3-dehydrosilychristin: 1,58 ekvivalents of gallic acid), ABTS+ scavenging (the highest activity had silychristin: 1,50 ekvivalents of vitamin C), inhibition of microsomal lipid peroxidation (the highest activity had 2,3-dehydrosilybin: IC50 = 10,6 µM),...