Separace cytostaticky aktivních sloučenin metodou hydrofilní interakční kapalinové chromatografie
Hydrophilic interaction liquid chromatography for separation of cytostatically active compounds
diplomová práce (OBHÁJENO)
Zobrazit/ otevřít
Trvalý odkaz
http://hdl.handle.net/20.500.11956/85511Identifikátory
SIS: 173347
Kolekce
- Kvalifikační práce [19062]
Autor
Vedoucí práce
Konzultant práce
Šlechtová, Tereza
Oponent práce
Kozlík, Petr
Fakulta / součást
Přírodovědecká fakulta
Obor
Klinická a toxikologická analýza
Katedra / ústav / klinika
Katedra fyzikální a makromol. chemie
Datum obhajoby
5. 6. 2017
Nakladatel
Univerzita Karlova, Přírodovědecká fakultaJazyk
Čeština
Známka
Výborně
Klíčová slova (česky)
HILIC, 7-deazaadenosin, separace, cytostatikaKlíčová slova (anglicky)
HILIC, 7-deazaadenosine, separation, cytostaticsTato diplomová práce se zabývá nalezením optimálních podmínek pro separaci čtyř skupin analytů odvozených od 7-deazaadenosinu (každá skupina obsahovala 4 derivatizované nukleosidy) pomocí hydrofilní interakční kapalinové chromatografie. Všech 16 studovaných analytů bylo syntetizováno jako potenciální cytostatika. Byl testován vliv typu stacionární fáze chromatografické kolony, poměru organické a vodné složky mobilní fáze, pH použitého pufru v mobilní fázi a koncentrace octanu amonného v tomto pufru v rozsahu 5 - 50 mM. Pro separace těchto analytů byly testovány tři různé stacionární fáze, a to čistě silikagelová (kolona Spherisorb® Silica), amidová (kolona TSKgel Amide-80) a nativní cyklofruktanová (kolona Frulic-N). Rozměry všech kolon byly stejné, tj. 2504,6 mm s velikostí částic 5 µm. Během optimalizace separace byl studován i retenční a separační mechanismus v HILIC. Bylo zjištěno, že ve všech testovaných chromatografických systémech se na mechanismu separace podílí jak rozdělování analytů mezi vodnou vrstvu částečně ukotvenou na povrchu stacionární fáze a mobilní fázi, tak i adsorpce analytů na stacionární fázi. Tři skupiny analytů (SK1, SK3, SK4) se podařilo separovat do 3 píků pouze částečně. Náznak separace do 4 píků byl zaznamenán pouze u směsí analytů SK1 a SK2 na koloně Frulic-N při...
This diploma thesis deals with optimization of separation conditions for the four groups of analytes related to 7-deazaadenosine (each group was composed of four derivatized nucleosides) using hydrophilic interaction liquid chromatography. All the sixteen analytes were synthesized as potentially cytostatically active compounds. The effect of the type of stationary phase in the chromatographic column, the ratio of organic and aqueous parts of the mobile phase, pH of the buffer used as the mobile phase component and the concentration of ammonium acetate in the buffer in the range of 5-50 mM were tested during the optimization process. Three stationary phases were tested - bare silica (Spherisorb® Silica column), silica- bonded amide (TSKgel Amide-80 column) and silica-bonded native cyclofructan 6 (Frulic-N column). The dimensions of all columns were 2504.6 mm i.d.; particle size 5 µm. During the optimization of separation the mechanism of HILIC was studied. It was found that the distribution of analytes between the aqueous layer partially coated on the surface of the stationary phase and the mobile phase and also the adsorption of analytes on the stationary phase participated in the retention and separation mechanism in all tested chromatographic systems. The three groups of analytes (SK1, SK3, SK4)...