Výskyt parazitických mikroorganismů u oslabených a zdravých populací včely medonosné (Apis mellifera )

Abstract

Oslabené včelstvá sú náchylné na napadnutie parazitmi. Aj napriek tomu v súčasnej dobe chýbajú údaje o výskyte parazitických prvokov vo včelstvách v ČR. Cieľom diplomovej práce bola detekcia eukaryotických parazitov (Nosema ceranae, Nosema apis, Crithidia mellificae a Apicystis bombi) vo vybraných českých včelstvách. Detekcia bola vykonaná v 9 lokalitách s rôznym počtom včelstiev a celkovo bolo študovaných 53 včelstiev v roku 2014 a 2015. Z každého včelstva boli odobrané vzorky dospelých včiel z krajného rámu plodového hniezda a vytvorené 3 vzorky po 10 jednincoch včely. V roku 2014 bol zistený liečebný spád roztoča Varroa destructor. Zo vzoriek včiel bola izolovaná DNA. Prítomnosť parazitov bola overená pomocou polymerázovej reťazovej reakcie (PCR) so špecifickými primermi. V prípade Crithidia mellificae bolo použitých 5 druhov detekčných primerov (SEF, SER; SSU, SSU rRNA, Cyt b, Tryp cyt b) a získané amplikóny boli klonované a sekvenované. Porovnaním sekvencií v GenBanku pri zhode 98-100% sekvenčnej identity bolo zistené, že sa jedná o druh Lotmaria passim, druh Crithidia mellificae zistený nebol. Druh Lotmaria passim bol prvýkrát preukázaný v Českej republike, s prevalenciou 79,2%. Pre detekciu Lotmaria passim vo včelách možno doporučiť primer Tryp cytb. Parazit Nosema ceranae bol detekovaný v...

Immunodeficient honey bee (Apis mellifera) colonies suffer from broad range of parasites including eukaryotic protozoa. Despite this fact, the eukaryotic parasites are still poorly documented in the Czech Republic. The presence of eukaryotic parasites (Nosema ceranae, Nosema apis, Crithidia mellificae and Apicystis bombi) was observed in different apiaries in the Czech Republic. The samples were taken in 9 apiaries in 53 beehives during the 2014/2015 season. From each beehive, 10 adult of honey bees were taken from the peripheral comb in triplicate. DNA was isolated from every sample of honey bees. The parasites were detected by polymerase chain reaction (PCR) with specific primers. The treatment fall of parasitic mite Varroa destructor was obtained from beekeepers for season of 2014. Crithidia mellificae was detected by 5 types of specific primers (SEF, SER; SSU, SSU rRNA, Cyt b, Tryp cyt b) and positive amplicons were cloned and sequenced. The obtained sequences were compared with GeneBank and showed similarity from 98-100% to sequences of Lotmaria passim (Trypanosomatid). Crithidia mellificae was not detected. L. passim had prevalence of 79,2% and is reported in the Czech Republic for the first time. Primer Tryp-cyt b is recommended for the routine detection of L. passim. Nosema ceranae was...