Účinky přírodních látek na viabilitu nádorových buněčných linií

Abstract

Nádorová onemocnění jsou jedním z nejzávažnějších problémů současné medicíny a jejich incidence neustále stoupá. Navzdory výraznému rozvoji terapeutických metod v posledních letech jsou tato onemocnění stále velmi obtížně léčitelná. Předkládaná práce se zabývá sledováním účinků přírodních látek - epigalokatechin galátu, kofeinu, etanolového extraktu z Cannabis sativa, vodného extraktu z Origanum acutidens a vodného extraktu z Mentha piperita na lidskou neuroblastomovou buněčnou linii UKF-NB-4. První část práce se zabývá určením viability lidské neuroblastomové buněčné linie UKF-NB-4 vystavené působení testovaných látek. Dále je studován vliv těchto látek na buněčný cyklus, aktivitu kaspáz a schopnost vyvolat apoptosu. Detekce výše zmíněných charakteristik byla prováděna na buněčném analyzátoru MUSETM a na průtokovém cytometru. Následně byla pomocí metody Western blot sledována hladina proteinu p53 a retinoblastomového proteinu v buněčné linii UKF-NB-4 vystavené působení testovaných látek. Největší vliv měl na viabilitu a buněčný cyklus lidské neuroblastomové buněčné linie epigalokatechin galát. Jeho působením dochází ke snížení viability UKF-NB-4, ke snížení exprese retinoblastomového proteinu a k zadržení přechodu buněk z G0/G1 do S fáze buněčného cyklu. Z výsledků nevyplývá, že by epigalokatechin...

Cancer is considered to be one of the most serious issues of medicine nowadays. Moreover, its incidence is still rising. Despite the huge progress in modern treatment methods, cancer therapy is still limited by many difficulties. This work focuses on the natural substances such as epigallocatechin gallate, caffeine, Cannabis sativa ethanol extract, Origanum acutidens water extract, Mentha piperita water extract and its effects on the human neuroblastoma cell line UKF-NB-4. The first part of the bachelor thesis deals with determining the viability of human neuroblastoma cell line UKF-NB-4 exposed to tested substances as well as it studies the effects of those substances on the cell cycle and caspase activity. Finally, it was tested, whether those substances are able to induce apoptosis in neuroblastoma cell lines. Tests were undertaken on the MUSETM cell analyzer and on the flow cytometer. The second part of the bachelor thesis focuses on the expression of protein p53 and retinoblastoma protein in neuroblastoma cell lines exposed to tested substances. Detection was carried out by Western blot analysis. Epigallocatechin gallate exhibited the most significant effect on human neuroblastoma cell line. It lowers the expression of retinoblastoma protein as well as it arrests cells between G0/G1 and S...