Analysis of amino acids and polyamines by HPLC and CZE

Abstract

(CZ) V rámci této diserta ní práce byly studovány dv skupiny amin . První z nich tvo í deriváty cyklického polyaminokarboxylátu DOTA (kyselina 1,4,7,10- tetraazacyklododekan-1,4,7,10-tetraoctová), které jsou významnými reak ními meziprodukty p i syntéze kontrastních látek pro magnetickou rezonanci (MRI). Výsadní postavení mezi t mito deriváty zaujímá tBu3DO3A (1,4,7,10- tetraazacyklododekan-1,4,7-tris(tert-butylacetát). Vedle tBu3DO3A byly detailn studovány dva typické vedlejší produkty syntézy tBu3DO3A, tj. tBu4DOTA (1,4,7,10-tetraazacyklododekan-1,4,7,10-tetrakis(tert-butylacetát) a tBu2DO2A (tBu2DO2A, i.e. 1,4,7,10-tetraazacyklododekan-1,4-bis(tert-butylacetát). Ke studiu výše zmín ných látek byla použita kapalinová chromatografie v reverzním módu (RP-HPLC) a kapilární zónová elektroforéza (CZE) s UV-VIS detekcí. Vyvinuté metody byly prakticky otestovány na analýze realných reak ních sm sí. Lze konstatovat, že ob metody p edstavují rychlé, ú inné a jednoduché ešení pro sledování syntézy nov vyvíjených MRI kontrastních látek, nebo mohou být použity p ímo, bez jakékoli další p edúpravy vzork reak ních sm sí. Druhá ást této práce se v nuje problému detekce polyamin a aminokyselin b žnou UV-VIS spektrometrií. Byl vyvinut a otestován nový "solid-phase" reaktor na bázi oxidu m natého vhodný pro...

(EN) This work is focused on two specific classes of amines. First group comprises of cyclic polyaminocarboxylates from the DOTA (1,4,7,10-tetraazacyclododecane- 1,4,7,10-tetraacetic acid) family, which are important reaction intermediates in magnetic resonance imaging (MRI) contrast agent synthesis. In the development of new contrast agents, carboxyl groups are very often protected with tert-butyl ester groups. Among these derivatives, tBu3DO3A is of the highest importance. Therefore, reverse-phase high performance liquid chromatographic (RP-HPLC) and non- aqueous capillary zone electrophoretic (CZE) methods were evaluated for qualitative and quantitative analysis of tBu3DO3A (1,4,7,10-tetraazacyclododecan-1,4,7- tris(tert-butylacetate) and two typical reaction by-products, i.e. tBu4DOTA (1,4,7,10- tetraazacyclododecan-1,4,7,10-tetrakis(tert-butylacetate) and tBu2DO2A (1,4,7,10- tetraazacyclododecan-1,4-bis(tert-butylacetate). These optimized methods were successfully applied to monitoring of real reaction mixtures during synthesis of a new MRI contrast agent. No further sample pretreatment was necessary. In the second part of the thesis, proteinogenic amino acids and polyamines were used as model analytes for development of a new post-column solid-phase reactor suitable for on-line derivatization...