Optimalizace HPLC metody pro separaci tetracyklinových antibiotik
Optimization of HPLC method for separation of tetracyclines
bachelor thesis (DEFENDED)

View/ Open
Permanent link
http://hdl.handle.net/20.500.11956/38058Identifiers
Study Information System: 86466
Collections
- Kvalifikační práce [17154]
Author
Advisor
Referee
Janečková, Lucie
Faculty / Institute
Faculty of Science
Discipline
Clinical and Toxicological Analysis
Department
Department of Physical and Macromolecular Chemistry
Date of defense
14. 6. 2011
Publisher
Univerzita Karlova, Přírodovědecká fakultaLanguage
Czech
Grade
Excellent
Keywords (Czech)
vysokoúčinná kapalinová chromatografie, reverzní mód, tetracyklinová antibitoika, optimalizace separaceKeywords (English)
high performance liquid chromatography, reverse mode, tetracycline antibiotics, optimization of separationTato bakalářská práce je zaměřena na nalezení optimálních separačních podmínek ve vysokoúčinné kapalinové chromatografii pro směs čtyř zástupců tetracyklinových antibiotik - tetracyklinu, chlortetracyklinu, doxycyklinu a oxytetracyklinu. Při vývoji metody byly použity čtyři různé chromatografické kolony s oktadecylovou stacionární fází v mobilních fázích o různém složení v reverzním modu s izokratickou elucí. Při použití dvou kolon (Astec C18 a Atlantis C18 I.) se podařilo rozseparovat testovanou směs tetracyklinů na základní linii. Nejvhodnějšími separačními podmínkami jsou kolona Atlantis C18 I. s mobilní fází o složení ACN/0,1% kyselina mravenčí 15/85 (v/v) při průtoku mobilní fáze 2 ml/min. Za těchto optimalizovaných podmínek došlo k rozdělení všech čtyř analytů na základní linii do 27,5 minut.
The aim of this work is to develop and to optimize HPLC method for separation of a set of four tetracycline antibiotics - tetracycline, chlortetracycline, oxytetracycline, and doxycycline. Four different reversed octadecyl-silica stationary phases in various mobile phase compositions were examined in isocratic elution. The baseline resolution of all the analytes was obtained by using two columns - Astec C18 and Atlantis C18 I. The optimized separation system consisted of Atlantis C18 I. column, ACN/0.1% formic acid 15/85 (v/v) as the mobile phase and flow rate of 2 ml/min. The baseline resolution was achieved and the analysis time did not exceed 27.5 minutes.