Optimalizace HPLC metody pro separaci tetracyklinových antibiotik

Abstract

Tato bakalářská práce je zaměřena na nalezení optimálních separačních podmínek ve vysokoúčinné kapalinové chromatografii pro směs čtyř zástupců tetracyklinových antibiotik - tetracyklinu, chlortetracyklinu, doxycyklinu a oxytetracyklinu. Při vývoji metody byly použity čtyři různé chromatografické kolony s oktadecylovou stacionární fází v mobilních fázích o různém složení v reverzním modu s izokratickou elucí. Při použití dvou kolon (Astec C18 a Atlantis C18 I.) se podařilo rozseparovat testovanou směs tetracyklinů na základní linii. Nejvhodnějšími separačními podmínkami jsou kolona Atlantis C18 I. s mobilní fází o složení ACN/0,1% kyselina mravenčí 15/85 (v/v) při průtoku mobilní fáze 2 ml/min. Za těchto optimalizovaných podmínek došlo k rozdělení všech čtyř analytů na základní linii do 27,5 minut.

The aim of this work is to develop and to optimize HPLC method for separation of a set of four tetracycline antibiotics - tetracycline, chlortetracycline, oxytetracycline, and doxycycline. Four different reversed octadecyl-silica stationary phases in various mobile phase compositions were examined in isocratic elution. The baseline resolution of all the analytes was obtained by using two columns - Astec C18 and Atlantis C18 I. The optimized separation system consisted of Atlantis C18 I. column, ACN/0.1% formic acid 15/85 (v/v) as the mobile phase and flow rate of 2 ml/min. The baseline resolution was achieved and the analysis time did not exceed 27.5 minutes.