Posttranslational modifications and structural alterations of protein synthesis elongation factor Tu in Actinomyces in relation to their life cycle

Abstract

Posttranslational modifications and structural alterations of protein synthesis elongation factor Tu in Actinomyces in relation to their life cycle Protein synthesis elongation factor Tu represents a multifunctional protein with potential role in signaling and regulation of cell metabolism. The complex life cycle of Streptomycetes requires monitoring of changes in their environment and signaling pathways to control it. Here we present the results of analysis of membrane phosphoproteomes from individual morphological stages of Streptomyces coelicolor with the aim to follow developmentally dependent heterogeneity and phosphorylation of intrinsic and externally added Strepomyces aureofaciens EF-Tu in membrane proteomes. We used Mycobacterium smegmatis, fast growing non-pathogenic Mycobacterium, as a non-differentiating actinomycete comparative model. Phosphorylation of intrinsic M. smegmatis and externally added Streptomyces EF-Tu was followed in membrane proteomes from exponential and stationary phase of M. smegmatis liquid culture. We have found that Streptomycetes membrane fraction contains protein kinase(s) catalyzing phosphorylation of both, its own, and an externally added EF-Tu, whereas Mycobacterium membrane fraction contains protein kinase phosphorylating only its own EF-Tu. In vitro phosphorylation...

Posttranslační modifikace a strukturní alterace protein syntetického elongačního faktoru Tu v aktinomycetách v relaci k jejich životnímu cyklu Proteosyntetický faktor EF- Tu reprezentuje multifunkční protein s potenciální rolí v signalizaci a regulaci buněčného metabolismu. Komplexní životní cyklus streptomycet vyžaduje monitorování změn v jejich prostředí a signalizace odpovědí k jejich kontrole. Zde reprezentujeme výsledky analýzy membránového fosfoproteomu v jednotlivých morfologických fázích Streptomyces coelicolor s cílem poukázání vývojově závislé heterogenity a fosforylace vlastního a externě přidaného Strepomyces aureofaciens EF-Tu v membránových proteomech. Použili jsme Mycobacterium smegmatis, rychle rostoucí non-patogenní Mycobacterium, jako model nediferencující aktinomycety. Fosforylace vlastního M. smegmatis a externě přidaného Streptomyces EF-Tu byla pozorována v membránových proteomech z exponencionální a stacionární fáze tekutých kultur M. smegmatis. Zjistili jsme, že membránová frakce streptomycet obsahuje protein kinázu (y) katalyzující fosforylaci obou, vlastního, a externě přidaného EF-Tu, zatímco membránová frakce mykobakterií obsahuje protein kinázu (y) fosforylující pouze vlastní EF-Tu. Ukázali jsme in vitro fosforylaci EF-Tu v buněčném extraktu z dormantních spor Streptomyces...