Studium nucené degradace canagliflozinu s využitím HPLC

Abstract

In this work a method for determination of canagliflozin and its degradation products by HPLC with UV and MS detector was developed. The developed method was used to study the forced degradation of canagliflozin and to investigate the major degradation products resulting from exposure of canagliflozin to oxidative stress. Canagliflozin is a phenolic glycoside derivative and a glucose-sodium transporter 2 inhibitor that stimulates urinary glucose excretion by suppressing glucose reabsorption from the proximal tubule in the kidneys. Canagliflozin is used to control blood glucose levels in patients with type 2 diabetes. In an optimized method, an Agilent Poroshell 120 SB-Aq (2.1 × 100 mm, 2.7 µm) column was used and a mixture of buffer (10mM HCOOH adjusted with ammonium hydroxide to pH 3.5) and acetonitrile as a mobile phase. The method validation included testing of accuracy, repeatability, the limit of detection and quantification, linearity and linear dynamic range, the robustness of the method, and testing of sample stability. The limit of detection of the method was 8.9·10-5 mg ml-1 (2.0·10-7 mol l-1 ) and the limit of quantification was 3.0·10-4 mg ml-1 (6.8·10-7 mol l-1 ). At a concentration of 0.3 mg ml-1 , the repeatability (n = 7) was 0.17 % and 0.75 % for the retention time and the peak...

Tato práce se zabývá vývojem a optimalizací metody pro stanovení canagliflozinu pomocí HPLC s UV a MS detekcí. Vyvinutá metoda byla následně použita pro studium nucené degradace této sloučeniny a zkoumání hlavních degradačních produktů vzniklých vystavením canagliflozinu oxidativnímu stresu. Canagliflozin je derivát fenolického glykosidu a inhibitor glukoso-sodného transportéru 2, který stimuluje močovou exkreci glukózy potlačením reabsorpce glukózy z proximálního tubulu v ledvinách. Canagliflozin se používá k řízení hladiny glukózy v krvi u pacientů s diabetem mellitu typu 2. V optimalizované metodě byla použita kolona Agilent Poroshell 120 SB-Aq (2,1 × 100 mm, 2,7 µm) a jako mobilní fáze byla použita směs pufru (10mM HCOOH upravená hydroxidem amonným na pH 3,5) a acetonitrilu. Součástí validace metody bylo testování přesnosti, opakovatelnosti, meze detekce a kvantifikace, linearity a lineárního dynamického rozsahu, robustnosti metody a testování stability vzorku. Mez detekce metody byla 8,9·10-5 mg ml-1 (2,0·10­7 mol l-1 ) a mez kvantifikace byla 3,0·10-4 mg ml-1 (6,8·10-7 mol l-1 ). Pro koncentraci 0,3 mg ml-1 byla opakovatelnost (n = 7) retenčního času, vyjádřená jako relativní směrodatná odchylka, 0,17 % a plochy píku 0,75 %. Pro koncentraci 5·10-3 mg ml-1 byla opakovatelnost retenčního času...