Vliv dihydromyricetinu na metabolismus ethanolu

Abstract

Dihydromyricetin (DHM), also ampelopsin, is a flavonoid compound which exhibits a broad spectrum of positive effects on the human body. Herbal extracts containing this compound have been widely used in traditional Chinese medicine mainly for their hepatoprotective properties. DHM also helps with alcohol intoxication and reduces the signs of hangover or abstinence. Given the fact that the mechanism of DHM effects on the ethanol metabolism has not been clarified yet, the effect of dihydromyricetin on the expression and activity of alcohol dehydrogenase (ADH), one of the most important enzymes involved in ethanol metabolism, was therefore studied in this thesis. The cultivation conditions of primary hepatocytes which were isolated from unpretreated and ethanol-pretreated rats and subsequently exposed to EtOH and DHM were optimized. While determining the degree of cell damage caused by EtOH in the presence of DHM, no significant trend in the protective effect of DHM was found. On the other hand, the protective effect of ethanol in hepatocytes cultivated in EtOH and DHM was detected by technique of ELISA (the determination of alanine transaminase). The Western blot technique followed by immunodetection did not detect the induction of ADH expression in hepatocytes. Furthemore, the modulation effect of...

Dihydromyricetin (DHM), též ampelopsin, je flavonoidní sloučenina vykazující široké spektrum pozitivních účinků na lidský organismus. Rostlinné výtažky obsahující tuto sloučeninu byly v tradiční čínské medicíně hojně využívány převážně pro své hepatoprotektivní vlastnosti. DHM též pomáhá při intoxikaci alkoholem a zmírňuje projevy kocoviny či abstinence. Vzhledem k tomu, že se dosud nepodařilo objasnit mechanismus účinků DHM na metabolismus ethanolu, byl proto v této diplomové práci studován vliv dihydromyricetinu na expresi a aktivitu alkoholdehydrogenasy (ADH), jednoho z nejdůležitějších enzymů zapojených do metabolismu ethanolu. Byly optimalizovány kultivační podmínky primárních hepatocytů izolovaných z nepremedikovaného a z ethanolem premedikovaného potkana vystavených působení EtOH a DHM. Při stanovení míry poškození buněk způsobené EtOH v přítomnosti DHM nebyl zjištěn žádný významný trend protektivního účinku DHM. Na druhou stranu byl technikou ELISA (stanovení alaninaminotransferasy) zaznamenán protektivní účinek ethanolu v hepatocytech kultivovaných v prostředí EtOH a DHM. Metodou Western blot s následnou imunodetekcí nebyla zjištěna indukce exprese ADH v hepatocytech. Dále nebyl zjištěn modulační vliv DHM na aktivitu ADH ve vzorcích hepatocytů ani na aktivitu purifikovaného enzymu. V...