Vliv endokrinních disruptorů na biotransformační enzymy
The influence of endocrine disruptors on biotransformation enzymes
diploma thesis (DEFENDED)
View/ Open
Permanent link
http://hdl.handle.net/20.500.11956/97889Identifiers
Study Information System: 184985
Collections
- Kvalifikační práce [20083]
Author
Advisor
Referee
Linhartová, Lucie
Faculty / Institute
Faculty of Science
Discipline
Biochemistry
Department
Department of Biochemistry
Date of defense
21. 5. 2018
Publisher
Univerzita Karlova, Přírodovědecká fakultaLanguage
Czech
Grade
Excellent
Endokrinní disruptory (ED) jsou látky, které interferují s endokrinním systémem a napodobují účinek endogenních hormonů v organismu. Mezi exogenní ED patří syntetický estrogen 17-ethinylestradiol (EE2), který je součástí hormonální perorální antikoncepce, a silný karcinogen benzoapyrene (BaP). Představitelem endogenních ED je přirozený hormon 17-estradiol (E2). V rámci diplomové práce byl pomocí kvantitativní PCR a metody Western blot zkoumán vliv uvedených endokrinních disruptorů a jejich kombinací na relativní míru genové a proteinové exprese cytochromů P450 1A1, 2C11 a 2C6 v játrech, plicích a ledvinách potkanů in vivo. Za použití metody HPLC byl dále studován efekt zmíněných ED a jejich kombinací na specifické aktivity CYP1A a CYP2C a na samotný metabolismus 17-ethinylestradiolu v mikrosomální frakci jater. Bylo potvrzeno, že BaP silně indukuje expresi i specifickou aktivitu CYP1A1 v játrech, plicích a ledvinách premedikovaných potkanů, zatímco samostatně podaný EE2 nebo E2 nemá na expresi tohoto CYP signifikantní vliv. Pokud jsou potkanům aplikovány estrogeny v kombinaci s BaP, dochází v játrech k výraznému poklesu genové exprese CYP1A1 indukované samostatně podaným BaP a naopak ke zvýšení indukčního efektu BaP v plicích. Specifická aktivita CYP1A1, kterou samostatně podaný BaP v...
Endocrine disruptors (ED) are compounds that interfere with the endocrine system by mimicking or antagonising the effects of endogenous hormones. The synthetic estrogen 17-ethinylestradiol (EE2), a major component of oral contraceptives and a human strong carcinogen benzoapyrene (BaP) are assigned as an exogenous ED whereas the natural estrogenic hormone 17-estradiol (E2) figures as an endogenic endocrine disruptor. In this thesis the rats were treated with these ED individually and in combination, and their effect was studied on the gene and protein expression of cytochrome P450 1A1, 2C11 and 2C6 in rat liver, lung and kidney. In addition, the effect of the mentioned ED and their combinations on CYP1A and CYP2C specific enzyme activity and on metabolism of 17-ethinylestradiol in rat liver microsomal samples was studied. Changes in CYP gene and protein expression were analyzed by real-time PCR and Western blotting, CYP specific activity and metabolism of EE2 were investigated by HPLC method. It has been confirmed that BaP acts as a strong inducer of CYP1A1 in rat liver, lung and kidney, whereas EE2 or E2 alone revealed no significant effect on the expression of this CYP. However, when EE2 or E2 were administered to rats together with BaP, they considerably decreased the BaP-mediated CYP1A1...