Studie imunitní odpovědi larev masařky Sarcophaga bullata

Abstract

Conclusion lnsect immune response is a complicated process. Antimicrobiď peptides fiequently act synergistically, some proteins have transporter functions, peptide inhibitors can block processing enzyrnes involved in activating cascades or different enzymes can activarc antimicrobially active proteins or peptides. In this study we presented nvo different isolation protocols, which resulted in the identification of several already known and two novel antirnierobial proteins or peptides from the hemolymph of the larvae of flesbfty. sareophaga bullan. We are the first group to monitor the timecourse of tissue-specific expÍession patlems of eight genes in Sarcophaga bullan |arvae ďter different immune challenges using qPCR. we show similarities, as well as differences in insect immune responses. we are also the first group to analyze the expression pattoms of the genes that encode sBp and sarcocystatin, proteins that are mainly connect€d with larvat development and metamorphosis. Using 2D- electrophoresis we analyzď the time.dependent immune response in larval fat bodies and hemocytes. We detect€d 9 up.regulated proteins in hemocyŮes and 15 differentially expressed proteins in fat body cells. We hope that our study will shed more light into ttre complex processes of immune responses in Sarcophaga bullan larvae. 20

Shrnutí Imunitní odpověd' hmvzu je komplikovaný proces. Antimikrobiální peptidy často působísynergicky, některé proteiny mají transportní funkci a peptidové inhibitory můŽou blokovat proteolytické štěpeníenzymů účastnícíchse aktivaěních kaskád nebo jiných enzymů, které mohou poté akdvovat antimikrobiálně aktivní proteiny a peptidy. V našístudii jsme prezentovali dva různéizolaění protokoly, které vyústily k identifikaci a charakterizaci několika jak znántyích tak no1'1í6}1 antinrikrobiálních proteinťr nebo peptit1ťr z henrolynfy larev masařky Sarcrp haga bu! Iata, Dále jsme se pokusili monitorovat časovou a áňově specifickou expresi osmi vybraných genůnasařky Sarcophaga bullata po vystavení larev nizným druhůmindukce imunitní odpovědi. Ukázali jsme podobnosti ale také rozdíIy vimunitní odpovědi mezi jednot|ivými druhy hmyzu a jejich vývojovými stádii (larvy čidospě|ci). Rovněž jsme analyzovali expresi genů proteinů SBP a sarcocystatinu, které jsou spojovány hlavně s vývojem a nretamorfózou larev. Pomocí 2D-elektroforéz a MS analýz jsme analyzovali časovou závislost imunitní odpovědi na úrovni expr.ese celkových proteinů v tukovém tělesu a hemocytech larev masařky. Detekovali jsem proteiny indukované' ale taképroteiny jejichž exprese je př.i imunitní odpovědi potlačena. Věříme, žetato naše studie...