Úloha proteinu Spr1851 Streptococcus pneumoniae v buněčném dělení

Abstract

Úloha proteinu Spr1851 Streptococcus pneumoniae v buněčném dělení S. pneumoniae, lidský extracelulární patogen, kóduje ve svém genomu unikátní serin/threoninovou kinázu eukaryotického typu StkP a k ní příslušnou fosfatázu PhpP. Tato kináza prostřednictvím fosforylace svých substrátů ovlivňuje řadu buněčných procesů, mezi které patří virulence, kompetence, buněčné dělení a syntéza buněčné stěny. Hypotetický protein Spr1851, později pojmenovaný Jag, byl identifikován jako nový substrát kinázy StkP v membránové frakci porovnáním fosfoproteomů divokého kmene a kmene s delecí pro StkP. Tento protein se skládá ze třech domén a interdoménové oblasti, která obsahuje místo fosforylace T89. Na N-konci se nachází Jag_N doména s neznámou funkcí. C-konec obsahuje domény dvě - KH a R3H, které jsou vysoce konzervované a jejích předpokládanou funkcí je vazba nukleových kyselin. Hlavním záměrem této práce bylo přiblížit funkci proteinu Jag, zjistit vliv jednotlivých domén na fenotyp a lokalizaci proteinu a určit roli fosforylace na T89. Získané výsledky potvrzují, že by protein Jag mohl hrát roli v buněčném dělení či syntéze buněčné stěny. Dále výsledky naznačují, že Jag_N doména je zásadní pro lokalizaci proteinu do membrány, zatímco za zmenšení buněk a růst, který je pozorovaný u delečního kmene, jsou zodpovědné KH a R3H...

The role of Spr1851 protein Streptococcus pneumoniae in cell division Human extracellular pathogen S. pneumoniae encodes unique serin/threonine protein kinase of Eucaryotic type StkP and its cognate phosphatase PhpP. This kinase affects number of cellular processes including virulence, competence, cell division and cell wall synthesis by phosphorylating its substrates. Hypothetical protein Spr1851 named Jag was identified as a new StkP substrate in the membrane fraction by comparing the wild-type phosphoproteomes with StkP deleted strain. This protein consists of three domains and an interdomain region that contains T89 phosphorylation site. There is a Jag_N domain with an unknown function at the N-terminus. The C-terminus contains two domains - KH and R3H, which are highly conserved and their expected function is binding of nucleic acid. The main aim of this work is to explain the function of Jag protein, to determine the effect of individual domains on the phenotype and the localization of the protein and to determine the role of phosphorylation on T89. The results confirm that Jag protein could play a role in cell division or cell wall synthesis. Furthermore, the results indicate that the Jag_N domain is essential for the localization of the protein into the membrane, whereas the KH and R3H domains are...