Vývoj experimentálního savčího modelu pro studium genetického onemocnění cystická fibrosa

Abstract

Cystická fibróza (CF) je vrozené dědičné onemocnění, které je vyvolané mutací genu pro protein CFTR (,,Cystic fibrosis transmembrane conductance regulator"). Nejzávažnější komplikací tohoto onemocnění je chronická infekce dýchacích cest způsobená bakterií Pseudomonas aerigunosa (PA), která vede k následnému úmrtí pacientů. Nejčastěji je tato infekce léčena antibiotiky. Značným problémem je, že tyto bakterie získávají rezistenci vůči nim a antibiotika přestávají být účinné. Z toho důvodu jsou hledány alternativní terapeutické postupy. Jednou ze studovaných možností je pasivní imunizace slepičími protilátkami proti virulenčnímu faktoru PA, lektinu PAIIL. Je prokázáno, že tyto protilátky dokáží bránit adhezi bakterií na povrchu plicního epitelu nemocných s CF. Pro účely pasivní imunizace byla studována jejich inhalace ve formě aerosolu experimentálními zvířaty. Bylo třeba zjistit jaké množství protilátky je inhalováno do dýchacího systému. Experimentálním zvířecím modelem byly myši kmene IRC CD1. Pro to, aby mohla být protilátka kvantifikována, musela být nejdříve označena pomocí fluorescenčního barviva FITC (fluorescein isothiokyanát). Značená protilátka byla následně aplikována myši pomocí neinvazivní intratracheální instilace a bylo zjišťováno jaké množství protilátky lze získat pomocí...

Cystic fibrosis (CF) is a congenital hereditary disease that is caused by CFTR (,,Cystic fibrosis transmembrane conductance regulator") mutation. The most serious complication of this disease is chronic infection of respiratory system that is caused by bacteria Pseudomonas aerigunosa (PA) which leads to subsequent death of patients. This infection is very often treated with antibiotics. The biggest problem is that these bacteria get resistance to them and antibiotics are not effective. For this reason, alternative therapeutic procedures are sought. One of the studied possibilities is passive immunization by hen yolk antibodies against virulence factor PA, lectin PAIIL. It has been proven, that hen egg yolk antibodies prevents adhesion of bacteria to the lung epithelium of CF patients. For the purpose of passive immunization, inhalation of hen egg yolk antibodies in the form of aerosols was studied by experimentals on animals. It was necessary to determine the amount of antibody inhaled into respiratory system. As an experimental animal model was used mouse strains ICR CD1. Antibody had to be labeled with fluorescent dye FITC (fluorescein isothiocyanate), in order to be able to quantified. The labeled antibody was subsequently applicated to the mouse by intratracheal instillation, whereby the amount...