Role of Smarca5 (Snf2h) chromation remodeling ATPase in hematopoitic development and erythropoiesis
Role chromation remoledačné ATPázy SMARCA5 v krvetvorbě vývoji červených krvinek
dizertační práce (OBHÁJENO)
Zobrazit/ otevřít
Trvalý odkaz
http://hdl.handle.net/20.500.11956/84649Identifikátory
SIS: 156547
Kolekce
- Kvalifikační práce [4323]
Autor
Vedoucí práce
Oponent práce
Divoký, Vladimír
Kořínek, Vladimír
Fakulta / součást
1. lékařská fakulta
Obor
-
Katedra / ústav / klinika
BIOCEV, 1. LF UK
Datum obhajoby
17. 5. 2017
Nakladatel
Univerzita Karlova, 1. lékařská fakultaJazyk
Angličtina
Známka
Prospěl/a
Klíčová slova (česky)
Smarca5, Snf2h, ISWI, hematopoéza, erytropoéza, fetální jatra, p53, hematopoetické kmenové buňky, multipotentní progenitory, buněčný cyklusKlíčová slova (anglicky)
Smarca5, Snf2h, ISWI, hematopoiesis, erythropoiesis, fetal liver, p53, hematopoietic stem cells, multipotent progenitors, cell cycleJaderný protein Smarca5 (Snf2h) je jeden z nejvíce konzervovaných chromatin remodelačních faktorů a molekulárních motorů u savců. ATPáza Smarca5 (a ostatní příbuzní zástupci proteinové nadrodiny SWI/SNF2) společně se svými vazebnými partnery vytváří několika podjednotkové remodelační komplexy, jež posouvají, odstraňují nebo přináší histonové oktamery na DNA za účelem regulace trankripce, replikace, oprav poškození DNA a jiných nepostradatelných buněčných funkcí. Ve své disertační práci se zabývám studiem myšího modelu delece genu Smarca5 na počátku definitivní krvetvorby. Jedinci s delecí genu Smarca5 v hematopoetické kmenové buňce (aktivní promotor Vav1) umírají během pozdního vývoje in utero v důsledku závažné anémie. Ve fetálních játrech těchto experimentálních zvířat jsme pozorovali akumulaci krvetvorných kmenových a progenitorových buněk (HSPCs) a inhibici jejich dozrávání do erythroidní a myeloidní buněčné řady. Popsané poruchy vývoje byly doprovázeny dysplastickými změnami na úrovni proerytroblastů a poruchami buněčného cyklu na přechodu z G2 do M fáze u bazofilních erytroblastů. Dále jsme pozorovali, že nedostatečná funkce Smarca5 zvyšuje hladinu tumor supresorového proteinu p53 v erythroidních progenitorech, aktivaci jeho transkripčních cílů a k postranslačním modifikacím, jež jsou...
The Imitation Switch (ISWI) nuclear ATPase Smarca5 (Snf2h) is one of the most conserved chromatin remodeling factors. It exists in a variety of oligosubunit complexes that move DNA with respect to the histone octamer to generate regularly spaced nucleosomal arrays. Smarca5 interacts with different accessory proteins and represents a molecular motor for DNA replication, repair and transcription. We deleted Smarca5 at the onset of definitive hematopoiesis (Vav1-iCre) and observed that animals die during late fetal development due to anemia. Hematopoietic stem and progenitor cells (HSPCs) accumulated but their maturation towards erythroid and myeloid lineages was inhibited. Proerythroblasts were dysplastic while basophilic erythroblasts were blocked in G2/M and depleted. Smarca5 deficiency led to increased p53 levels, its activation at two residues, one associated with DNA damage (S-18) second with CBP/p300 (K376Ac), and finally activation of the p53 targets. We also deleted Smarca5 in committed erythroid cells (Epor-iCre) and observed that animals were anemic postnatally. Furthermore, 4- OHT-mediated deletion of Smarca5 in the ex vivo cultures confirmed its requirement for erythroid cell proliferation. Thus, Smarca5 plays indispensable roles during early hematopoiesis and erythropoiesis.