Stanovení komplexačních konstant metodou částečného plnění a analýzou průtokem způsobené disperze a jejich srovnání s hodnotami stanovenými metodou afinitní kapilární elektroforézy

Abstract

Ke stanovení komplexačních konstant modelového systému čtyř profenů (R-Flurbiprofen, S-Ibuprofen, S-Ketoprofen a S-Naproxen) komplexujících s β-cyklodextrinem byla využita metoda částečného plnění kapiláry (Patrial Filling method, PF) a analýza průtokem způsobené disperze (Flow Induced Dispersion Analysis, FIDA). Při využití metody částečného plnění, při které je jen část kapiláry naplněna selektorem a analyt tak musí migrovat nejprve zónou selektoru a následně zónou čistého základního elektrolytu (v obou zónách má rozdílnou pohyblivost), je sledována změna migračního času analytu v závislosti na délce zóny selektoru. Při analýze průtokem způsobené disperze, ve které je analyt protlačován kapilárou externím tlakem, je sledována míra disperze píku v závislosti na koncentraci selektoru v kapiláře. Průběh experimentů při PF metodě byl také teoreticky vyřešen za pomoci počítačového simulačního programu Simul 5 Complex. Hodnoty komplexačních konstant získané oběma metodami byly porovnány s hodnotami získanými běžně využívanou metodou afinitní kapilární elektroforézy (ACE). Porovnáním stanovených komplexačních konstant bylo zjištěno, že obě námi zkoumané metody poskytují srovnatelné výsledky s výsledky získanými metodou ACE.

Partial Filling method (PF) and Flow Induced Dispersion Analysis (FIDA) were used for the determination of stability constants of model system of four profens (R-Flurbiprofen, S-Ibuprofen, S-Ketoprofen and S-Naproxen) complexing with β-cyclodextrin. When using PF method, only a part of capillary is filled with the selector and thus the analyte must migrate through the zone of selector first and then through the neat BGE (it has different mobilities in both zones). Dependency of the differences in migation time on the length of the selector zone is then studied. When FIDA is used, the analyte in pushed through the capillary by external pressure and dependency of the rate of peak dispersion of the analyte on the concentration of selector in capillary is observed. Moreover, PF experiments were theoretically studied by Simul 5 Complex computing programme. Values of stability constants obtained by both methods were compared with values obtained by frequently used Affinity Capillary electrophoresis (ACE) method. The comparison of stability constants values determined by PF method and FIDA shows that both investigated methods grants results comparable with those obtained by the ACE.