Characterization and utilization of feacal microflora components in experimental models of human civilisation diseases

Abstract

Interaction between intestinal microbiota and host mucosal immune system plays crucial role in maintenance of mucosal homeostasis. Dysbiosis, altered composition of microbial communities, has been shown to be associated with life-style diseases such as inflammatory bowel disease (IBD) or allergies. In this regard, probiotics are valuable tool for the improvement of gut microbiota disbalance and proper stimulation of the immune system. In this thesis we focused on taxonomical classification of Bifidobacterium longum human origin strains by PCR-based methods, in vitro characterization of immunomodulatory properties of selected Bifidobacterium and Lactobacillus strains and evaluation of the beneficial effect of selected bacterial strains in IBD and allergy experimental mouse models. We investigated four different PCR-based methods and biochemical analysis for the taxonomical classification of twenty-eight B. longum isolates from the healthy human faeces. The Amplified Ribosomal DNA Restriction Analysis was the only method to be able to differentiate the analyzed strains into the B. longum/infantis subspecies. We showed that the analyzed immunostimulatory properties of bifidobacterial strains are strictly strain-specific. In a mouse model of acute ulcerative colitis, we have demonstrated that...

Interakce mezi st evní mikroflórou a slizni ním imunitním systémem hostitele hraje klí ovou roli p i udržování slizni ní homeostázy. Bylo prokázáno, že dysbióza, zm na ve složení mikrobiálních spole enstev, m že vést k rozvoji civiliza ních onemocn ní, jakými jsou nap . zán tlivá st evní onemocn ní (IBD) nebo alergie. V tomto ohledu jsou probiotika cenným nástrojem pro zmírn ní nerovnováhy st evní mikroflóry s vhodnou stimulací imunitního systému. V této práci jsme se zam ili na taxonomickou klasifikaci kmen Bifidobacterium longum lidského p vodu metodami založenými na PCR, in vitro charakterizaci imunomodula ních vlastností vybraných bakterií rodu Bifidobacterium a Lactobacillus a stanovení p íznivého ú inku vybraných bakterií v experimentálních myších modelech IBD a alergie. Pro taxonomickou klasifikaci dvaceti osmi izolát B. longum získaných ze stolice zdravých lidí jsme využili metody založené na PCR a biochemické analýze. K diferenciaci analyzovaných kmen do poddruh B. longum/infantis byla nejúsp šn jší metoda ARDRA. Potvrdili jsme, že imunostimula ní vlastnosti analyzovaných kmen bifidobakterií jsou p ísn kmenov specifické. V myším modelu akutní ulcerózní kolitidy jsme ukázali, že profylaktické podávání kmene B. longum ssp. longum CCM 7952 je schopné zabránit rozvoji závažné formy st evního...