Stanovení esterů testosteronu v injekční lékové formě metodou HPLC-DAD

Abstract

Anabolické steroidy jsou v současné době velmi kontroverzním tématem nejen pro své terapeutické využití, ale především z důvodu nezákonného zneužívání ve sportovním odvětví. Cílem této bakalářské práce byl vývoj rychlé, selektivní, účinné a jednoduché metody vysokoúčinné kapalinové chromatografie vhodné ke stanovení vybraných anabolických steroidů v injekční lékové formě. Analyzovaný vzorek farmaceutického přípravku Sustamed obsahoval čtyři estery testosteronu - testosteron propionát, testosteron fenylpropionát, testosteron isokaproát a testosteron dekanoát. Optimalizované HPLC-DAD podmínky vhodné ke stanovení vybraných esterů testosteronu byly následující: povrchově porézní kolona Poroshell HPH-C18 (3,0 × 100 mm, 2,7 µm), mobilní fáze složená z 10mmol/l roztoku octanu amonného o pH 4,5 a acetonitrilu za gradientové eluce. Kolona byla temperována na 50 řC, objem nástřiku byl 1 µl, průtok byl nastaven na 1 ml/min a detekce probíhala při 240 nm. Celková doba analýzy byla 6 minut. Klíčová slova anabolické steroidy, estery testosteronu, HPLC-DAD

Anabolic steroids are currently very controversial issue not only for its therapeutic use but especially because of the illegal abuse in the sport branch. The aim of this thesis was to develop a rapid, selective, effective and simple method of high performance liquid chromatography suitable for the determination of anabolic steroids in injectable dosage form. The analyzed sample of pharmaceutical product Sustamed contained four testosterone esters: testosterone propionate, testosterone phenylpropionate, testosterone isocaproate and testosterone decanoate. Optimized HPLC-DAD conditions suitable for determination of the selected testosterone esters were as follows: core-shell column Poroshell HPH-C18 (3.0 x 100 mm, 2.7 mm), mobile phase consisted of 10mmol/l ammonium acetate, pH 4.5 and acetonitrile, gradient elution was used. The column was thermostated at 50 řC, injection volume was 1 µl, flow rate was set at 1ml/min and UV detection at 240 nm. Total analysis time was 6 minutes. Key words anabolic steroids, testosterone esters, HPLC-DAD