Stanovení aminokyselin pomocí coulometrického detektoru s výměnnou náplní

Abstract

Tato diplomová práce rozvíjí dříve vyvinutou konstrukci coulometrického detektoru s výměnnou náplní s mikrokuličkami skelného uhlíku, modifikuje způsob jeho plnění a rozšiřuje možnosti náplně o mikročástice mědi. V případě plnění uhlíkovými mikročásticemi jde zejména o testování různého složení suspenze a urychlování plnění prostřednictvím dávkování vzduchových bublin, v případě mikročástic mědi byla modifikována i základní konstrukce detektoru a mimo postupu plnění byly testovány také vhodné způsoby aktivace povrchu měděných částic a čištění celého detektoru Pomocí vícerozměrné statistické analýzy byla vyvinuta metoda stanovení tyrosinu technikou FIA s coulometrickou detekcí na detektoru z mikrokuliček skelného uhlíku. Optimálními podmínkami pro stanovení tyrosinu byly: průtok 0,6 ml·min-1 , potenciál 1,3 V, objem dávkovací smyčky 50 µl, v prostředí B-R pufru o pH 4,5. Mez detekce byla stanovena na hodnotu 0,5 µmol·dm-3 a mez stanovitelnosti 1,6 µmol·dm-3 . Fenylalanin byl stanoven technikou FIA s detekcí pomocí coulometrického detektoru s výměnnou náplní mikrokuliček mědi. Jako optimální podmínky pro stanovení byly určeny tyto: průtok 0,6 ml·min-1 fosfátového pufru o pH 6,8, potenciál 0,2 V a objem dávkovací smyčky 20 µl. Po naměření kalibračních křivek byly zjištěny mez detekce a stanovitelnosti...

This Master Thesis evolves the previously developed construction of coulometric detector with replaceable filling with microspheres of glassy carbon, modifies the filling proces and introduces copper microparticles as the electroactive material. In case of carbon microbeads, different composition of the filling suspension and rapid fillig replacement by means of air bubbles injecting is tested; in case of copper microbeads, also the general construction of the detector was modified and besides the filling process, suitable procedure for the activation of the copper surface and for the cleaning of the detector was seeked. Multivariate statistical analysis was used for the development of method for the determiantion of tyrosine using FIA with electrochemical detection on the detector made of glassy carbon beads. The optimum conditions for the determination of tyrosine were: flow rate 0.6 ml·min-1 , the potential of 1.3 V, the volume ot the injection loop of 50 µl, in a B-R buffer pH 4.5. The limit of detection was determined to 0.5 µmol·dm-3 and the limit of quantification to 1.6 µmol·dm-3 . Phenylalanine was determined by the FIA with the coulometric detection, using detector filled with copper microparticles. optimum conditions for the determination were as follows: flow rate 0.6 ml·min-1 phosphate...