Vizualizace buněčných struktur listu Malus domestica pro účely studia interakce s patogenem Venturia inaequalis

Abstract

Houbový patogen Venturia inaequalis způsobuje strupovitost jabloní, nejzávažnější chorobu těchto dřevin. Poznatky získané o odpovědi jabloně na napadení strupovitostí na buněčné a pletivové úrovni jsou nedostačující. Zavedení metod vizualizace buněčných komponent listu jabloně je klíčové pro studium interakce Malus-Venturia na buněčné a pletivové úrovni. V této práci byl úspěšné zaveden pokusný rostlinný materiál v in vitro i ex vitro podmínkách a optimalizována metoda infekce rostlin konidiemi patogena. Pro vizualizaci buněčných struktur v listu jabloně byly využity metody vitálního značení, in situ imunolokalizace, transformace, environmentální skenovací elektronové mikroskopie a konfokální mikroskopie. Z buněčných struktur listu jabloně byl vizualizován cytoskelet, buněčná stěna a kutikula. Dále byly provedeny předběžné experimenty sledující změny struktur buněčné stěny indukované napadením V. inaequalis. Dále byly během ontogeneze listů sledovány změny kutikuly, která představuje první bariéru pro průnik patogena během infekce. Powered by TCPDF (www.tcpdf.org)

Apple scab, the most serious disease of apple is caused by fungal pathogen Venturia inaequalis. Knowledge about the apple response to apple scab attack on the cellular and tissue level is insufficient. For studies of Malus-Venturia interaction on the cellular and tissue level, the establishment of methods for cell structures visualization in apple leaves is necessary. In this work, the experimental plant material grown in vitro and ex vitro was successfully established and the method of apple infection by conidia of V. inaequalis was optimized. Various methods of cell components visualization such as vital staining, in situ immunolocalization, transformation, environmental scanning electron microscopy and confocal microscopy, were tested. Cell structures, such as the cytoskeleton, the cell wall and the cuticle were visualized in apple leaves. Preliminary experiments following specific the changes of cell wall structures induced by V. inaequalis attack were performed. Further, changes of cuticle structure, the first barrier for penetration of pathogen to plant tissues during infection, were observed during the leaf ontogenesis. Powered by TCPDF (www.tcpdf.org)