Možná úloha proteinu DAXX v zástavě buněčného cyklu a buněčné senescenci

Abstract

Death domain-associated protein 6 (DAXX) je multifunkčním proteinem, který se účastní rozličných buněčných procesů. Funguje jako regulátor transkripce, histonový chaperon nebo regulátor apoptózy, ve které je jeho úloha dosti kontroverzní. Účastní se také regulace odpovědi buňky na poškození DNA (DDR). Vytváří a stabilizuje komplex s Mdm2, který negativně reguluje stabilitu významného nádorového supresoru p53. Ten je součástí signalizačního uzlu v DDR. Pokud není poškození DNA pro buňku letální a současně neumožňuje pokračovat v proliferaci, dochází ke stavu nevratné zástavy buněčného cyklu, tzv. buněčné senescenci. Za fyziologických podmínek může navození senescence zabraňovat rozvoji tumorigeneze. Proto má popis mechanizmů, které se podílejí na navození senescence, potenciální klinický význam. Cílem mé diplomové práce bylo stanovit změnu množství proteinu DAXX v senescentních buňkách a charakterizovat způsob jeho regulace. V nádorových buňkách MCF-7 a primárních BJ fibroblastech jsem pozoroval snížení hladiny proteinu DAXX a regulaci jeho množství na proteinové úrovni. Otestoval jsem hypotézy, podle kterých navýšení jeho množství před poškozením DNA zabrání vstupu buňky do senescence, nebo zvýšení jeho exprese v senescenci způsobí obnovu buněčné proliferace. Obě hypotézy byly zamítnuty. Bylo by...

Death domain-associated protein 6 (DAXX) is a multifunctional protein involved in diverse cellular processes. It acts as a histone chaperone or regulator of transcription and apoptosis, in which is its role quite controversial. DAXX also participates in regulation of cell DNA damage response (DDR). DAXX co-creates and stabilizes complex with Mdm2, which negatively regulates the stability of p53, an important tumor suppressor, which is a part of signalling node in the DDR. If DNA damage is not lethal for the cell and unables it to proliferate, the irreversible state of cell cycle called cellular senescence takes place. Under physiological conditions, induction of senescence can prevent the development of tumorigenesis. Therefore, the description of mechanisms involved in the induction of senescence has potential clinical significance. In my thesis, I aimed to determine changes in the level of DAXX protein in senescent cells and to characterize the manner of its regulation. In tumor cells MCF-7 and primary BJ fibroblasts, I observed decrease in DAXX protein level and its regulation. I tested the hypothesis according to which an increase in DAXX level before DNA damage canprevent induction of cellular senescence, or increase in its expression during senescence can cause recovery of cell proliferation....