Analysis of PKCα Influence on Cancer Cell Invasion.

Abstract

8 Abstrakt Proteín kináza C alfa (PKCα) patrí do rodiny serín/treonínových kináz. Jej úloha je dôležitá v regulácii bunkovej polarity, sekrécie proteínov, apoptózy, proliferácie, diferenciácie a v tumorogenéze. Jej dôležitosť bola taktiež preukázaná v regulácii migrácie a invazivity nádorových buniek. Cieľom tejto práce bolo preskúmať potenciálnu úlohu PKCα v amoeboídnej invazivite nádorových buniek a jej vplyv na nádorovú morfológiu a invazivitu. Preukázalo sa, že vyššia expresia PKCα viedla k mezenchymálno-amoeboídnej tranzícii mezenchymálnych nádorových línií K2 a MDA, ktorá bola sprevádzaná s poklesom schopnosti nádorových buniek invadovať v 3D prostredí kolagénu. Zvýšená expresia PKCα nemala žiaden efekt na morfológiu amoeboídne invadujúcej nádorovej línie A375m2, s vyššou hladinou PKCα bol však spojený trend zvýšenia invazívneho potenciálu tejto melanómovej línie. Obdobne, expresia dominantno-negatívnej formy PKCα viedla k amoeboídne-mezenchymálnemu prechodu buniek A375m2. Zníženej aktivita PKCα taktiež viedla k zníženiu invazívneho potenciálu nádorových línií K2 a MDA. V práci sme taktiež overili prepojenie regulácie PKCα kinázy s aktivitou phosphatidylinositol 3-kinázy (PI3K). Výsledky ukázali, že zvýšená hladina PKCα a jej fosforylovanej formy viedla k zníženiu aktívnej formy Akt naznačujúc možnú...

7 Abstract Protein kinase C alpha (PKCα) is a serine/threonine protein kinase. PKCα is an important protein regulating cell polarity, protein secretion, apoptosis, cell proliferation and differentiation and tumorogenesis. Previous research has shown a role of PKCα also in a cancer cell migration and cancer cell invasion. The aim of this study was to investigate the role of protein kinase C alpha (PKCα) played in amoeboid mode of cancer cell invasion. We showed that higher expression of PKCα resulted in mesenchymal-amoeboid transition of K2 and MDA mesenchymal cancer cell lines, which was accompanied with decreased cancer cell invasive capability in 3D collage matrix. PKCα overexpression had no effect on the cell morphology of A375m2, however, the results showed a trend in increased invasive potential of A375m2 cells. Conversely, the expression of dominant-negative PKCα resulted in amoeboid-mesenchymal transition of A375m2 cells, and it was associated with decreased invasive potential of K2 and MDA cell lines. Furthermore, a linkage between PKCα and phosphatidylinositol 3-kinase (PI3K) was tested. The results revealed that increased activity of PKCα was accompanied with decreased level of active Akt in K2 cell line. To summarize, our results suggest a probable role of PKCα in regulation of amoeboid...