Optimalizace podmínek pro stanovení trimethylsilylfosfátů pomocí GC-MS

Abstract

Fosfolipidy jsou důležitou součástí buněčných membrán, kde vytváří dvojvrstvy, které jsou charakteristické pro jednotlivé skupiny bakterií. Vlivem prostředí se mohou měnit růstové a produkční vlastnosti bakterie, které je možné sledovat změnou zastoupení fosfolipidů v membráně. K identifikaci a stanovení bakteriálních fosfolipidů se běžně využívá tenkovrstvá nebo kapalinová chromatografie. Pro stanovení polárních částí fosfolipidů byla použita plynová chromatografie. Metoda slouží jak k identifikaci, tak k určení celkového zastoupení polárních částí (fosfát, fosfoglycerol, fosfoethanolamin a fosfoserin) v molekule. Před vlastní analýzou je nutné polární části derivatizovat. Princip zvolené derivatizace spočívá v použití dvou různých silylačních činidel. K nalezení optimálních podmínek přípravy vzorků byl použit chemometrický postup označovaný jako experimentální design, který umožňuje určit faktory a jejich kombinace, které mají na zkoumanou odpověď největší vliv. Cílem bakalářské práce je vývoj a statistická optimalizace přípravy vzorku pro identifikaci standardů fosfátu a fosforylovaných sloučenin (fosfoglycerol, fosfoethanolamin a fosfoserin) z cytoplazmatické membrány bakterie Bacillus subtilis. Klíčová slova optimalizace, derivatizace, silylace, biologicky významné fosfáty, plynová chromatografie