Spektrofotometrické stanovení chondroitinsulfátu technikou sekvenční injekční analýzy

Abstract

Tato diplomová práce se zabývá optimalizací stanovení chondroitin sulfátu sekvenční injekční analýzou za spektrofotometrické detekce. Reakce probíhá za přítomnosti fenothiazinových kationtových barviv (azur A, azur B a methylenová modř) a měří se pokles absorbance barviv v jejich absorpčním maximu po přidání chondroitin sulfátu (CS). Byly nalezeny optimální podmínky pro toto stanovení: koncentrace barviv 5 10-5 mol dm-3 , dávkovaný objem 100 µl CS+ 50 µl barviva + 100 µl CS, reakční čas 0 s a průtoková rychlost 40 µl s-1 . Pro stanovení CS ve statickém uspořádání bylo zjištěno, že nejnižší meze detekce a stanovitelnosti bylo dosaženo při použití methylenové modře (LOD = 0,23 mg l-1 a LOQ = 0,76 mg l-1 ). Pro toto barvivo bylo dosaženo i nejlepší opakovatelnosti a to 2,4 %. Ovšem nejcitlivější bylo stanovení s použitím azuru A. Pro stanovení CS v SIA uspořádání bylo dosaženo nejnižší meze detekce a stanovitelnosti u azuru A (LOD = 0,34 mg l-1 a LOQ =1,01 mg l-1 ), opakovatelnost byla taktéž nejlepší 1,9 %. Jako nejcitlivější metoda se projevilo stanovení s použitím azuru B Na základě těchto poznatků byl chondroitin sulfátu stanoven v potravinových doplňcích, kde se ukázala jako vhodnější metoda kalibrační přímky. Stanovení bylo provedeno i v přítomnosti interferujících látek a to chloridu sodného a...

This thesis deals with the optimization determination of chondroitin sulfate sequential injection analysis with spectrophotometric detection. The reaction proceeds in the presence of phenothiazine cationic dyes (Azure A, Azure B and methylene blue) and measuring the decrease absorbance dyes in their absorption maximum after the addition of chondroitin sulfate. Have found the optimum conditions for this determination: dye concentration 5 10-5 mole dm-3 , the dosing volume 100 µl CS + 50 µl dye + 100 µl CS, reaction time 0 s, flow rate 40 µl s-1 . For the determination of the CS in a static arrangement was found the lowest limit of detection and quantification using metylene blue (LOD = 0,23 mg l-1 a LOQ = 0,76 mg l- 1 ). The best repeatibility was achieved also using methylene blue 2,4 %. On the other side the best sensitivity was achieved using azure A. For the determination of the CS in SIA arrangement was found the lowest limit of detection and quantification using azure (LOD = 0,34 mg l-1 a LOQ =1,01 mg l-1 ). The best repeatibility was achieved also using azure A 1,9 %. And the best sensitivity was achieved using azure B. Based on these findings was chondroitin sulphate determined in food supplements, the more suitable method were the calibration curve .The determination was also carried out...