Development, characterization and use of anti-orphan cytochrome P450 antibodies
Vývoj, charakterizace a použití protilátek proti orfanovým cytochromům P450
diplomová práce (OBHÁJENO)
Zobrazit/ otevřít
Trvalý odkaz
http://hdl.handle.net/20.500.11956/63490Identifikátory
SIS: 141153
Kolekce
- Kvalifikační práce [20073]
Autor
Vedoucí práce
Oponent práce
Koblas, Tomáš
Fakulta / součást
Přírodovědecká fakulta
Obor
Klinická a toxikologická analýza
Katedra / ústav / klinika
Katedra biochemie
Datum obhajoby
25. 5. 2015
Nakladatel
Univerzita Karlova, Přírodovědecká fakultaJazyk
Angličtina
Známka
Výborně
Klíčová slova (česky)
xenobiotics, cytochrome P450, immunodetection, chicken antibodiesKlíčová slova (anglicky)
xenobiotics, cytochrome P450, immunodetection, chicken antibodiesCytochromy P450 jsou důležité enzymy účastnící se metabolických pochodů, které využívají exogenní i endogenní látky jako substráty pro různé enzymatické reakce. Tyto enzymy mohou také jako substrát využít prekarcinogeny a aktivovat je na karcinogeny, což může vést k rozvoji rakoviny. Některé chemopreventivní látky mohou zvyšovat aktivitu cytochromů P450, a tím i riziko rozvoje rakoviny. Proto je důležité věnovat náležitou pozornost studiu mechanismu účinku těchto enzymů a vlivu chemopreventivních sloučenin na jejich aktivitu. mRNA exprese většiny isoforem cytochromů P450 je pozorovatelná ve zdravých (netransformovaných) tkáních, například játrech, mozku, srdci, tlustém střevě, ledvinách či placentě. Přesto existuje několik cytochromů P450, jejichž mRNA jsou v netransformovaných tkáních exprimovány málo, zatímco jejich exprese v transformovaných tkáních je znatelně vyšší. Jedním z takovýchto enzymů je CYP2W1, který může být použit jako prognostický marker kolorektální rakoviny - proto je užitečné mít schopnost detekovat přítomnost tohoto enzymu v různých tkáních. Detekce cytochromů P450 může být dosaženo metodou Western blot. V této metodě je imunodetekce provedena s využitím specifických protilátek. Pro tyto účely jsou nejčastěji používány savčí protilátky (IgG), ale protilátky izolované z...
The cytochromes P450 (P450s) are important enzymes involved in metabolic pathways, which use exogenous and endogenous substances as their substrate for various enzymatic reactions. These enzymes can also use precarcinogens as their substrate and activate them into carcinogens, which leads to a cancer development. If the P450s are induced, the cancer risk increases. Some chemopreventive compounds may induce the P450s and thus be harmful to the human body. Therefore it is necessary to pay enough attention to a study of the mechanism of action of P450s and the influence of the chemopreventive compounds on the activity of cytochromes P450. mRNA expression of most of the P450s isoforms is detected in a number of healthy (nontransformed) tissues, viz. liver, brain, heart, colon, kidney or placenta. Nevertheless there are a few P450s isoforms which mRNAs are expressed at relatively low levels in the nontransformed tissues, whereas the expression in the transformed tissues is significantly higher. One of these P450s is CYP2W1, which can be used as a prognostic marker for colorectal cancer - therefore it is useful to be able to detect a presence of this enzyme in various tissues. A detection of P450s can be accomplished by using a method Western blot. In this method, the immunodetection is achieved by using...