Role of glial cells in the immune response of mice infected by neurotropic fluke Trichobilharzia regenti

Abstract

Centrální nervová soustava (CNS) může být napadena celou řadou cizopasníků, včetně parazitických helmintů. Imunitní odpověď hostitele zahrnuje při těchto infekcích nejenom účast periferních leukocytů, ale mohou se na ní podílet i astrocyty a mikroglie, rezidentní gliové buňky CNS. Aktivace astrocytů a mikroglií byla v poslední době potvrzena i při infekci myších hostitelů neurotropní ptačí motolicí Trichobilharzia regenti (Digenea: Schistosomatidae), pro niž savci představují náhodné hostitele. Parazit v nich nedospívá a vyvolává v CNS rozvoj zánětlivé odpovědi, která se může podílet na jeho destrukci. Hlavním cílem této práce bylo zhodnotit na základě in vitro experimentů možnou úlohu astrocytů a mikroglií v imunitní odpovědi myší proti motolici T. regenti. Za tímto účelem byly zavedeny postupy pro přípravu primárních kultur myších astrocytů a mikroglií a tyto buňky byly následně stimulovány antigeny T. regenti (homogenátem transformovaných cerkárií a rekombinantními katepsiny B1.1 a B2). Následně byla v těchto kulturách vyhodnocována produkce oxidu dusnatého a vybraných prozánětlivých cytokinů (IL-1 beta, IL-6, TNF-alfa). Získané výsledky ukázaly, že in vitro stimulované astrocyty a mikroglie zvyšují produkci oxidu dusnatého, IL-6 a TNF-alfa. Taková odpověď může mít vliv na průběh infekce in...

A central nervous system (CNS) can be invaded by plenty of parasites, including parasitic helminths. Host's immune response during such infections includes not only participation of peripheral lymphocytes, but also astrocytes and microglia, resident glial cells present in the CNS. Activation of astrocytes and microglia has been recently demonstrated also in mice infected by neurotropic avian trematode Trichobilharzia regenti (Digenea: Schistosomatidae) for which mammals represent accidental hosts. The parasite does not mature in them and elicits development of inflammatory reaction in the CNS which may take part in parasite's destruction. Employing in vitro experiments, this thesis aimed at evaluation of the possible role of astrocytes and microglia in murine immune response to T. regenti. For this purpose, primary astrocyte and microglia culture preparations were established and the cells were then stimulated by antigens of T. regenti (homogenate of transformed cercariae, recombinant cathepsins B1.1 and B2). After that, production of nitric oxide and proinflammatory cytokines (IL-1 beta, IL-6, TNF-alpha) was measured. The results revealed that in vitro stimulated astrocytes and microglia increase production of nitric oxide, IL-6 and TNF-alpha. Such response to parasite's antigens could influence...