Molecular Pathology of Rett Syndrome

Abstract

Molekulární patologie Rettova syndromu Abstrakt Rettův syndrom (RTT) je závažné X-vázané neurovývojové onemocnění postihující téměř výlučně dívky. Onemocnění je charakterizováno regresem psychomotorického vývoje, zhoršením nebo ztrátou řeči a jemné motoriky, získanou mikrocefálií, stereotypními pohyby rukou a epileptickými záchvaty. Většina případů RTT je způsobena de novo mutacemi v MECP2 genu kódujícím metyl-CpG-vazební protein 2 (MeCP2). MeCP2 protein sehrává důležitou funkci v regulaci genové exprese, chromatinové remodelaci a také je zapojen do procesu sestřihu RNA. Atypické varianty RTT s těžším průběhem příznaků (varianta se záchvaty s časným nástupem a kongenitální varianta) mohou být také způsobeny mutacemi v genech CDKL5 a FOXG1, případně dalších. Laboratoř pro studium mitochondriálních poruch na Klinice dětského a dorostového lékařství 1. LF UK a VFN je jediným centrem pro DNA diagnostiku RTT v České republice. Proto je dizertační práce zacílená především na zdokonalení molekulární diagnostiky RTT dle současných vědeckých poznatků. Zavedli jsme analýzu rozsáhlých delecí a duplikací pomocí metody MLPA (multiplexní, na ligaci závislá amplifikace prob). Pomocí kombinace sekvenační analýzy kódující sekvence MECP2 genu a MLPA jsme u 80 pacientek prokázali přítomnost kauzální mutace, z toho 11 mutací...

Molecular pathology of Rett syndrome Abstract Rett syndrome (RTT) is a severe X-linked neurodevelopmental disorder affecting almost exclusively females. It is characterized especially by psychomotor regression, loss of acquired speech and purposeful hand skills, acquired microcephaly, repetitive stereotypic hand movements, and epileptic seizures. Most of RTT cases are caused by de novo mutations in the MECP2 gene encoding a methyl-CpG-binding protein 2 (MeCP2). The MeCP2 protein plays an important role in regulation of gene expression, chromatin remodeling, and is also involved in RNA splicing. More severe atypical RTT variants (early-onset seizure and congenital variant) may also be caused by mutations in other genes, such as CDKL5 or FOXG1. The Laboratory for study of mitochondrial disorders at Department of pediatrics and adolescent medicine is the only center of DNA diagnostics of RTT in Czech Republic. Therefore, the thesis was focused especially on improving the molecular diagnostics according to the recent research progress. We established the analysis of large deletions and duplications by multiplex ligation-dependent probe amplification (MLPA). Combining the sequencing and MLPA analysis of the MECP2 gene we confirmed the causative mutations in 80 patients. 11 mutations were novel. Mutation analysis...