Stanovení flavonoidů v doplňcích stravy s využitím micelární elektrokinetické chromatografie

Abstract

Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra Analytické chemie Kandidát Mgr. Martina Dvořáková Konzultant Doc. RNDr. Marii Pospíšilové, CSc Název rigorózní práce Stanovení flavonoidů v doplňcích stravy s využitím micelární elektrokinetické chromatografie Byla vyvinuta a validována nová metoda micelární elektrokinetické chromatografie (MEKC) s UV detekcí pro separaci a současné stanovení katechinu, epikatechinu, rutinu, kvercetinu, luteolinu, hesperetinu, kaempferolu, apigeninu a isorhamnetinu. Separace byla optimalizována testováním parametrů jako je typ, koncentrace a pH* základního elektrolytu, koncentrace ionogenního smáčedla dodecylsíranu sodného (SDS), druh a koncentrace cyklodextrinů a organických rozpouštědel, separační napětí a teplota separace. Analýzy byly provedeny v nepotažené křemenné kapiláře (vnitřní průměr 75 µm, celková délka 60 cm, efektivní délka 50 cm), s hydrodynamickým dávkováním při tlaku 50 mbarů po dobu 6 s. Základní elektrolyt obsahoval 5 mM dihydrogenfosforečnanu sodného, 30 mM kyseliny borité, 60 mM SDS, 20% (v/v) methanolu, 5% (v/v) butanolu a 8 mM 2-hydroxypropyl-γ-cyklodextrinu. pH* základního elektrolytu bylo upraveno na 7,6 pomocí 17% roztoku amoniaku. Detekce probíhala při UV 210 nm. Teplota kapiláry byla udržována na 20řC, vkládané...

Charles University in Prague, Faculty of Pharmacy in Hradec Králové Department of Analytical Chemistry Candidate Mgr. Martina Dvořáková Consultant Doc. RNDr. Marii Pospíšilové, CSc Title of Thesis Determination of flavonoids in food supplements using micellar electrokinetic capillary chromatography A new method of micellar electrokinetic chromatography (MEKC) with UV detection for the simultaneous determination of catechin, epicatechin, rutin, quercetin, luteolin, hesperetin, kaempferol, apigenin and isorhamnetin was devised and validated. The MEKC analysis was optimized for the type, concentration and pH* of the background electrolyte, the concentration of sodium dodecyl sulphate (SDS), the type and concentration of cyclodextrins and organic solvents, applied voltage and operating temperature. The analysis was carried out in a fused-silica capillary (internal diameter 75 µm, total length 60 cm, effective length 50 cm) with UV detection at 210 nm, voltage 30 kV, hydrodynamic sample injection at 50 mbar for 6 s and temperature 20řC. The optimal background elektrolyte of pH* 7.6 (adjusted with 17% of ammonia solution) contained 5 mM potassium dihydrogen phosphate + 30 mM boric acid, 60 mM SDS, 20% (v/v) of methanol, 5% (v/v) of butanol and 8 mM 2-hydroxypropyl-γ-cyclodextrin. The calibration curve of...