Vývoj a validace HPLC metody pro analýzu pilokarpinových lékopisných očních kapek

Abstract

Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra analytické chemie Kandidát: Mgr. Tereza Bažantová Školitel: PharmDr. Ludmila Matysová Ph.D. Název rigorózní práce: Vývoj a validace HPLC metody pro analýzu pilokarpinových lékopisných očních kapek. Byla vyvinuta a částečně validována metoda vysokoúčinné kapalinové chromatografie (HPLC) pro stanovení pilokarpin-hydrochloridu v lékopisných očních kapkách o koncentraci 1 a 2% účinné látky. V odborné literatuře bylo popsáno množství HPLC metod, stanovujících pilokarpin-hydrochlorid v očních kapkách. Metody využívají různé stacionární i mobilní fáze a rozdíly jsou také v době trvání samostatné analýzy. V této práci je popsán vývoj metody, vycházející z práce autorů El-Deeb S, Schepers U a Wätzig H.: Evaluation of monolithic C18 HPLC columns for the fast analysis of pilocarpine hydrochloride in the presence of its degradation products publikované v roce 2006 v časopisu Pharmazie [17]. Byla použita monolitická kolona Chromolith High Resolution RP 18 endcapped 100 x 4,6 mm, Merck, Německo, způsob provedení chromatografie obráceného systému fází. Použitá mobilní fáze byla složena z pufru o pH 3 a methanolu v poměru 98:2 (V/V), rychlost průtoku 1 ml/min. Výsledky byly vyhodnoceny použitím UV-VIS detektoru při vlnové délce 220 nm. Pro...

Charles University in Prague Faculty of Pharmacy in Hradec Králové Department of Analytical Chemistry Candidate: Mgr. Tereza Bažantová Supervisor: PharmDr. Ludmila Matysová Ph.D. Title of rigorous thesis: Development and validation of HPLC method for analysis of pharmacopoeial eye drops with pilocarpine. High-performance liquid chromatography method (HPLC) for the determination of pharmacopoeial pilocarpine-hydrochloride eye drops with a concentration of 1 and 2% was developed and partially validated. A variety of HPLC methods have been described in the specialized literature for the determination of pilocarpine-hydrochlorid in eye drops. The methods use different stationary and mobile phases and the differences are in the time of analysis. This work describes development of the method based on the work of authors El-Deeb S, Schepers U and Wätzig H.: Evaluation of Monolithic C18 HPLC columns for the fast analysis of pilocarpine-hydrochloride in the presence of its degradation products published in 2006 in the journal Pharmazie [17]. It was performed using a reverse phase liquid chromatography with a monolithic column Chromolith High Resolution RP 18 endcapped 100 x 4.6 mm, Merck, Germany. The used mobile phase was composed of buffer pH 3 and methanol in the ratio 98:2 (V/V) at the flow rate 1 ml /...