Vlastnosti a apoptóza jaterních hvězdicových buněk v cirhotických játrech potkanů

Abstract

Liver fibrosis represents a significant worldwide health problem. It is a response of liver to repeated injury and it is characterized by breakdown of normal extracellular matrix (ECM) resembling basement membrane in composition and by accumulation of ECM containing fibrillar type I collagen. Although more than one potential source of ECM exist, the largest part of connective tissue components is synthesized by activated hepatic stellate cells (HSC). Hepatic stellate cells are located in the space of Disse between endothelial cells and parenchymal cells and their main function is the uptake and storage of vitamin A and other retinoids. Inducing or accelerating their apoptosis is a potential way of liver fibrosis treatment. Aim of our study was to find out how collagen gell influences HSC as the effect of ECM on HSC apoptosis has not been studied yet. We have used gel made of type I collagen, the main component of fibrotic liver ECM, to study how it affects spontaneous apoptosis of HSC isolated from carbon tetrachloride damaged liver and the apoptosis of normal HSC exposed to apoptosis inducing agents, gliotoxin, cycloheximide and cytochalasin D, in vitro. HSC were prepared by perfusion of rat normal and cirrhotic liver with pronase and collagenase solutions, followed by centrifugation of the cell...

SOUHRN Jaterní fibróza vzniká v důsledku chronických jaterních onemocnění a působením nejrozličnějších příčin či podnětů. Dochází k nadměrné tvorbě, hromadění a ukládání extracelulární matrix (ECM), především kolagenu typu I, která způsobuje přestavbu jater a může přejít až v jaterní cirhózu. Jde o dynamický proces novotvorby a odbourávání ECM, které je produkováno zejména jaterními hvězdicovými buňkami (HSC). HSC se nacházejí v Disseho prostoru, hrají důležitou roli v hospodaření s vitamínem A. Při poškození jater se z klidového (quiescent) stadia aktivují, proliferují, získávají myofibroblastový fenotyp a produkují velké množství ECM. Experimentální studie prokázaly vratnost fibrotického procesu, přičemž možnost, jak snížit počet nadbytečných aktivovaných HSC je odstranění pomocí programované buněčné smrti (apoptózy), nebo návrat zpět do klidového stavu. Cílem naší práce bylo popsat a navzájem porovnat buňky klidové, aktivované in vitro a in vivo. Zaměřili jsme se na vliv trojrozměrné kolagenní matrix na apoptózu jaterních hvězdicových buněk, neboť vliv kolagenu typu I na apoptózu nebyl doposud sledován. In vivo byla aktivace HSC vyvolána intragastrickým podání třech dávek tetrachlormethanu potkanům. In vitro jsme apoptózu indukovali třemi rozdílnými toxiny - gliotoxinem, cykloheximidem a cytochalasinem...