Detekce opioidních receptorů v membránových frakcích mozku. Vazebné studie se specifickými radioligandy.

Abstract

Morfin je významný opioid využívaný v medicíně jako silné analgetikum. Při léčbě chronické bolesti se však při opakovaném podávání rozvíjí tolerance a fyzická závislost. Morfin se váže na všechny tři základní typy opioidních receptorů: μ-OR, δ-OR a κ-OR. Primární a dominantní význam pro vznik drogové závislosti mají receptory μ-OR. Cílem výzkumu farmaceutických firem je proto najít látku s povahou silného agonisty μ-OR, která bude vykazovat stejný analgetický účinek jako morfin, ale nebude vyvolávat drastickou závislost na této droze při dlouhodobém užívání. V této práci jsme se zaměřili především na studium vazby agonisty DAMGO na μ- opioidní receptory. Tyto receptory jsou primárně zodpovědné za fyziologický účinek morfinu i vznik závislosti na droze. Studium vazby radioaktivně značeného agonisty [3 H]DAMGO bylo provedeno ve frakcích získaných při izolaci plasmatických membrán (PM) z cerebrálního kortexu potkana. Izolace PM byla provedena na hustotním gradientu Percollu. Plasmatické membrány byly připraveny z kontrolních potkanů a potkanů, kterým byly po dobu 10 dnů podávány stoupající dávky morfinu, 10-50 mg/ kg. V izolovaných plasmatických membránách se stanovil počet specifických vazebných míst a afinita vazby [3 H]DAMGO v inkubačním médiu bez iontů. Zjistili jsme, že PM izolované z mozku...

Morphin is an important opioid drug which is used in medicine as a highly potent analgesic in treatment of both acute and chronic pain, post-traumatic shock and diarrhea. However, in treatment of chronic pain, the serious problem is represented by step-by-step development of decreased sensitivity of physiological response to morphine exposure (tolerance) and, subsequently, the psychological as well as physical dependence on this drug. Opioids interact with three types of opioid receptors: μ-OR, δ-OR and κ-OR. One of primary goals of many pharmaceutical companies is an effort to design more specific and simultaneously potent OR agonists, which would exhibit highly efficacious analgesic effects, but would not develop fast physical dependence in conditions of the long-term usage. In our work, the primary attention was devoted to μ-OR because these receptors are primarily responsible for physiological effect of morphine and genesis of tolerance and drug dependence. We studied the binding of specific agonist [3 H]DAMGO to plasma membranes (PM) isolated from rat brain cortex of rats adapted to increasing doses of morphine (10-50 mg/kg) for 10 days. PM isolated by centrifugation in Percoll density gradient from morphine-adapted rats exhibited the decrease of maximum binding capacity Bmax of this...