Odpověď metastatických buněčných linií karcinomu prostaty na genotoxický stres

Abstract

Rakovina prostaty je u mužů čtvrtá nejčastější příčina úmrtí v oblasti nádorových onemocnění. Jedním z nejúčinnějších léčebných přístupů je v současnosti radikální prostatektomie následovaná terapeutickým ozařováním. Tato metoda však není stoprocentně účinná; až u 53 % pacientů se po ozařování objeví sekundární nádory. Dle naší hypotézy samo ionizující záření indukuje v buňkách změny, týkající se zejména epiteliálně-mesenchymální tranzice a kmenovosti, které umožňují nádoru metastázovat. Abychom tuto hypotézu ověřili, ozařovali jsme buňky metastatické nádorové linie rakoviny prostaty DU145 frakcionovaným zářením 10 x 2 Gy a sledovali jsme expresi vybraných epiteliálních, mezenchymálních a kmenových markerů před a po ozáření. Kromě toho jsme se zaměřili na subpopulaci tzv. plovoucích buněk, které vznikají během ozařování. Tyto buňky jsou schopny přežít ozařovací režim, po nějaké době přisednou zpět na podklad a dají vzniknout readherentní populaci. Naším cílem bylo stanovit, v jaké fázi buněčného cyklu se tyto buňky nacházejí a zda, příp. jak rychle proliferují. V této práci jsme ukázali, že ozařování působí jen malé změny týkající se epiteliálního/mesenchymálního a kmenového charakteru adherentní frakce DU145 buněk. Dále jsme experimentálně prokázali, že malá populace buněk je schopná přežít proces...

Prostate cancer is the fourth most frequent cause of cancer-related deaths in men worldwide. One of current successful approaches to treat prostate cancer is radical prostatectomy followed by radiotherapy. However, this treatment is not 100% successful, as 53% patients develop secondary tumors. Our hypothesis is, that ionizing radiation itself contributes to the development of metastases by inducing changes in cell phenotype, particularly in terms of epithelial-to-mesenchymal transition and stemness. To test this hypothesis, we irradiated the cells of metastatic prostate cancer cell line DU145 by fractionated radiation 2 x 10 Gy and we compared the expression of selected epithelial, mesenchymal and stem-cell markers prior to and after irradiation. Besides we focused on a subpopulation of so called floating cells which arise during irradiation. These cells can survive the radiation treatment and after some time they are able to reattach and give rise to readherent population. We wanted to asses what is the cell cycle profile of these cells and whether and how fast they proliferate. In this thesis we have shown that radiation causes only minor changes in epithelial/mesenchymal and stem-like character of adherent fraction of the DU145 cell line. However, we have also described that small population of...