Analýza derivátů pterinu kapilární zónovou elektroforézou

Abstract

Pteriny patří do důležité skupiny látek fungující jako inhibitory, senzitizéry, enzymy, koenzymy, pigmenty atd. a spolu s karotenoidy a anthrachoninony jsou zodpovědné za charakteristické zbarvení ploštic. Tato práce byla zaměřena na vývoj kapilární elektroforetické separační metody pro analýzu šesti vybraných derivátů pterinu (biopterinu, neopterinu, isoxanthopterinu, leukopterinu, xanthopterinu a erythropterinu) a jejich následnou identifikaci ve třech formách ploštice Graphosoma semipunctatum. Separace byly realizovány v křemenné nemodifikované kapiláře termostatované na teplotu 30 řC. Separační elektrolyt se skládal z kyseliny borité, tris(hydroxymethyl)aminomethanu a disodné soli ethylendiamintetraoctové kyseliny. V rámci optimalizační procedury byl studován vliv pH pufru, koncentrace jednotlivých složek základního elektrolytu, velikosti separačního napětí a vlnové délky UV detekce na elektromigrační chování a citlivost detekce. Za optimalizovaných separačních podmínek byly analyzovány organické extrakty ze tří forem ploštice Graphosoma semipunctatum.

Pterins belong to an important group of compounds, acting as inhibitors, sensiziters, enzymes, coenzymes, pigments etc. and together with carotenoids and anthraquinones are responsible for characteristic coloration of bugs. This work was focused on the development of a capillary electrophoretic separation method for the analysis of six pterine derivatives, namely biopterine, neopterine, isoxanthopterine, leukopterine, xanthopterine and erythropterine and on their identification in the real samples. Separation was conducted in an uncoated fused-silica capillary termostated at 30 řC. Separation electrolyte contained boric acid, tris(hydroxymethyl)aminomethane and disodium salt of ethylenediaminetetraacetic acid. The effects of buffer pH, concentration of electrolyte components, separation voltage and wavelength of UV detection on electromigration behavior and detection sensitivity were studied. Under the optimized separation conditions, organic extracts of the three forms of Graphosoma semipunctatum bugs were analyzed.