Testování protizánětlivého účinku bakterálních komponent na buňkách makrofágových a epitelových linií

Abstract

Anti-inflammatory effects of bacterial components tested on RAW 264.7, J774.A1 macrophage cell lines and on macrophages isolated from the peritoneum of BALB/c mice. Inflammatory bowel diseases (IBD) including Crohn's disease and ulcerative colitis results from a dysregulated inflammatory response of the host to intestinal microbes in genetically predisposed individuals. Despite intensively proceeding research the mechanism of this action remains unclear. In our previous studies we confirmed that some bacterial lysates isolated from Lactobacillus casei DN11400, Bacteroides distasonis and mycobacterial heat shock proteins (HSP) mitigate the severity of experimental colitis in mice. The aim of our study was to investigate whether these bacterial components have an influence on macrophages which play an important role in mediating chronic inflammation. We tested the effect of bacterial components on macrophage cell lines RAW 264.7 and J774.A1 and on macrophages isolated from the peritoneum of BALB/c mice. Viability of the macrophages we tested by flow cytometry. Qualitative and quantitative determination of cytokines in supernatants was evaluated by protein microarrays and by ELISA. Another aim was to provide evidence of changes in the activation of the NFқB signaling pathway. We observed that the bacterial...

Testování protizánětlivého účinku bakteriálních složek na buněčných liniích RAW 264.7, J774,A1 a na makrofázích izolovaných z peritonea myši BALB/c Idiopatické střevní záněty (ISZ) zahrnující Crohnovu chorobu a ulcerozní kolitidu vznikají u geneticky predisponovaných jedinců v důsledku abnormální imunitní odpovědi na složky komenzální mikroflóry. Mechanizmus tohoto působení zůstává navzdory intenzivně probíhajícímu výzkumu neobjasněn. Naše předchozí studie potvrdily, že bakteriální lyzáty izolované z kmene Lactobacillus casei DN114001, Bacteroides distasonis a mykobakteriální proteiny tepelného šoku (HSP) zmírňují průběh kolitidy u experimentálních myších modelů ISZ. Cílem naší studie bylo objasnit vliv bakteriálních složek na makrofágy, jež hrají důležitou úlohu při vzniku chronického zánětu. Efekt bakteriálních komponent jsme testovali na makrofágových liniích RAW 264.7 a J774A.1 a na makrofázích izolovaných z peritonea myší BALB/c. Životnost makrofágů byla testována průtokovou cytometrií. Kvalitativní a kvantitativní zastoupení cytokinů v supernatantech bylo stanoveno proteinovými mikročipy a metodou ELISA. Dalším cílem bylo prokázat změny v aktivaci signální dráhy NFкB pomocí kitu TransAM. Zjistili jsme, že bakteriální komponenty neovlivňují životnost kultivovaných buněk. Prokázali jsme, že bakteriální...