Interakce proteinů Prp22 a Prp45 ve spliceosomu pučící kvasinky
The interaction of Prp22 and Prp45 proteins in budding yeast spliceosome
diplomová práce (OBHÁJENO)
Zobrazit/ otevřít
Trvalý odkaz
http://hdl.handle.net/20.500.11956/32070Identifikátory
SIS: 66425
Kolekce
- Kvalifikační práce [19109]
Autor
Vedoucí práce
Oponent práce
Malcová, Ivana
Fakulta / součást
Přírodovědecká fakulta
Obor
Buněčná a vývojová biologie
Katedra / ústav / klinika
Katedra buněčné biologie
Datum obhajoby
21. 9. 2010
Nakladatel
Univerzita Karlova, Přírodovědecká fakultaJazyk
Čeština
Známka
Výborně
Klíčová slova (česky)
sestřih pre-mRNA, PRP22, PRP45Klíčová slova (anglicky)
pre-mRNA splicing, PRP22, PRP45Protein Prp22 je DEAH box RNA helikáza, která má dvě funkce v sestřihu pre-mRNA: účastní se druhé transesterifikační reakce (ATP independentní funkce) a uvolňuje maturovanou mRNA ze spliceosomu (ATP dependentní funkce). Prp45p, kvasinkový ortholog lidského transkripčního koregulátoru SNW/SKIP, je esenciální sestřihový faktor, přítomný ve spliceosomu po celou dobu sestřihové reakce. Mutanta prp45(1-169) geneticky interaguje s některými alelami NTC komplexu a sestřihovými faktory druhého kroku, včetně PRP22. Jedním z výsledků této práce je zjištění, že mutanty prp22(-158T) a prp22(-327A), které jsou synteticky letální s mutací prp45(1-169), mají kvůli mutaci v upstream regulační oblasti sníženou hladinu proteinu Prp22. Mutanty prp22(-158T), prp22(300PPI) a prp22(-327A) ovlivňují sestřih pre-mRNA s mutací v 5'ss v závislosti na sekvenci druhého exonu. N-terminální mutanty prp22(∆301) a prp22(∆350) jsou synteticky letální s prp45(1-169). Syntetická letalita je možná způsobena snížením efektivity vazby Prp22p do spliceosomů na úroveň, která není pro buňky již viabilní.
Protein Prp22 is a DEAH box RNA helicase, which plays two distinct roles in pre-mRNA splicing: it participates in second transesterification step (ATP independent function) and it releases mature mRNA from the spliceosome (ATP dependent function). Prp45p, yeast ortholog of the human transcription co-regulator SNW/SKIP, is an essential splicing factor, it is included in spliceosome throughout the splicing reaction. Mutant prp45(1-169) genetically interacts with some alleles of NTC complex and second step splicing factors, one of them is also gene PRP22. Here we present, that mutants prp22(-158T) and prp22(-327A), which are synthetically lethal with prp45(1-169), express lower amount of Prp22p due to the mutation in upstream regulation region. Mutants prp22(-158T), prp22(300PPI) and prp22(-327A) affect splicing of pre-mRNA with mutation in 5'ss with respect to sequence of the second exon. N-terminal mutants prp22(∆301) and prp22(∆350) are synthetically lethal with prp45(1-169). Synthetic lethality is possibly caused by lower efficiency of Prp22 recruitment to the spliceosomes, which is no more viable for cells.