Funkční analýza kvality spermií po působení vybraných endokrinních disruptorů

Abstract

Cíl Cílem mé práce bylo zjistit, zda vybrané endokrinní disruptory (EDs) mají vliv na reprodukční parametry spermií. Moje práce se díky dvěma experimentálním modelům, na kterých byl zkoumán vliv vybraných ED, dělí na dvě části: A) pokusy na praseti divokém (Sus scrofa), B) pokusy na okounu říčním (Perca fluviatilis L.). A) Na kančím modelu byl testován vliv vybraných EDs (zearalenone (ZEN), di(2-ethylhexyl) ftalát (DEHP), vinklozolin (VIN) na průběh kapacitace, akrosomální reakce in vitro a změny v detekci a lokalizaci vybraných proteinů. B) Na rybím modelu byl zkoumán vliv vybraného ED bisfenol A (BPA) na motilitu a rychlost pohybu rybích spermií Výsledky Savčí model U savčího modelu zkoumané EDs průkazně ovlivňovaly průběh kapacitace i akrosomální reakci ve srovnání s kontrolními vzorky. Metodou průtoková cytometrie jsem prokázala nárůst počtu značených buněk v průběhu kapacitace a snížení počtu značených buňek po AR a porovnala rozdíly mezi experimentálními vzorky a kontrolními. Ve vyšších koncentracích EDs jednoznačně potlačovaly akrosomální reakci a tudíž snižovaly počet spermií schopných oplození. Vypovídací schopnost výsledků detekce akrosomální reakce byla potvrzena využitím různých metodických přístupů (imunofluorescence, imunodetekce, SDS elektroforéza, chlotetracyklinová analýza). Rybí model U...

The aim The aim of my study was to determine whether the selected endocrine disruptors (EDs) affect reproductive parameters of sperm. Due to two experimental models, in which was tested the influence of selected Eds, my work is divided into two parts: A) On the boar model (Sus scrofa) was tested effect of selected EDs (zearalenone (ZEN), di(2-ethylhexyl) phthalate (DEHP), vinclozolin (VIN) on the course of capacitation, acrosome responses in vitro and changes in the detection and localization of selected proteins. B) On the fish model (Perca fluviatilis L.) was tested the influence of the selected ED- bisphenol A (BPA) on the motility and velocity of fish sperm movement. Results Mammalian model In mammalian model the course of capacitation and acrosome reaction was significantly influencing by the examined EDs in comparision with control samples. The increase of the number of marked cells during capacitation and reduce of the number of marked cells after AR compared with the differences between experimental and control samples was confirmed by the flow cytometry method. At higher concentrations EDs clearly inhibited acrosome response and thus reduce the number of sperm capable of fertilization. The relevancy of the results of detection acrosome reaction was confirmed by using various methodological...