Show simple item record

Study of β-N-acetylhexosaminidase in tobacco plants
dc.contributor.advisorRyšlavá, Helena
dc.creatorValenta, Robert
dc.date.accessioned2017-04-21T07:00:15Z
dc.date.available2017-04-21T07:00:15Z
dc.date.issued2010
dc.identifier.urihttp://hdl.handle.net/20.500.11956/30834
dc.description.abstractβ-N-acetylhexosaminidasy jsou přítomny ve všech živých organismech, avšak informací o tomto enzymu v rostlinách a především listech je známo málo. V případě rostlinných β-N-acetylhexosaminidas se spekuluje o možné obranné funkci proti houbovým i jiným patogenům a také o degradaci zásobních glykoproteinů. Z listů tabáku (Nicotiana tabacum L.) byla precipitací síranem amonným, gelovou chromatografií na koloně Sephacrylu S-300 a afinitní chromatografií na koloně Con A-Sepharosy připravena β-N- acetylhexosaminidasa o specifické aktivitě 190 nmol min-1 mg-1 pro substrát p-NP-GlcNAc. Byla stanovena Michaelisova konstanta a maximální rychlost reakce β-N- acetylhexosaminidasy pro substrát p-NP-GlcNAc (Km = 0,33 mM a Vmax = 414 nmol min-1 mg-1 ). Pomocí kapilární elektroforézy bylo studováno štěpení diacetylchitobiosy β-N- acetylhexosaminidasou. Stanovená aktivita β-N-acetylhexosaminidasy pro diacetylchitobiosu byla více než jedenáctkrát nižší než v případě aktivity β-N-acetylhexosaminidasy pro substrát p-NP-GlcNAc. Z těchto výsledků lze usoudit, že chitobiosa, a pravděpodobně ani další chitooligomery, nejsou přirozeným substrátem β-N-acetylhexosaminidasy a tedy neslouží primárně k ochraně před houbovými patogeny. Přirozeným substrátem by mohly být spíše oligosacharidové řetězce glykoproteinů.cs_CZ
dc.description.abstractβ-N-acetylhexosaminidases are ubiquitous in all living organisms, but there is little information about these enzymes in plants, especially in leaves. Suggested functions of plant β-N-acetylhexosaminidases are participation in defence responses against fungal and other pathogens and also in degradation of storage glycoproteins. β-N-acetylhexosaminidase from tobacco leaves (Nicotiana tabacum L.) was purified to final specific activity 190 nmol min-1 mg-1 with p-NP-GlcNAc as substrate. Precipitation by ammonium sulphate, gel filtration chromatography on Sephacryl S-300 column and affinity chromatography on Con A- Sepharose column were used. Michaelis constant and maximal reaction rate of β-N- acetylhexosaminidases determined for p-NP-GlcNAc was 0.33 mM and 414 nmol min-1 mg-1 , respectively. The cleavage of diacetylchitobiose catalyzed by β-N-acetylhexosaminidase was studied using capillary electrophoresis. Determined activity of β-N-acetylhexosaminidase for diacetylchitobiose was more than 10-times lower compared to β-N-acetylhexosaminidase activity for p-NP-GlcNAc. These results indicate that chitobiose and probably other chitooligomers are not natural substrates of β-N-acetylhexosaminidase and thus this enzyme is most likely not involved in protection against fungal pathogens. Natural substrate...en_US
dc.languageČeštinacs_CZ
dc.language.isocs_CZ
dc.publisherUniverzita Karlova, Přírodovědecká fakultacs_CZ
dc.subjectβ-N-acetylhexosaminidaseen_US
dc.subjecttobaccoen_US
dc.subjectcapillary electrophoresisen_US
dc.subjectdiacetylchitobioseen_US
dc.subjectβ-N-acetylhexosaminidasacs_CZ
dc.subjecttabákcs_CZ
dc.subjectkapilární elektroforézacs_CZ
dc.subjectdiacetylchitobiosacs_CZ
dc.titleStudium β-N-acetylhexosaminidasy v rostlinách tabákucs_CZ
dc.typebakalářská prácecs_CZ
dcterms.created2010
dcterms.dateAccepted2010-06-15
dc.description.departmentDepartment of Biochemistryen_US
dc.description.departmentKatedra biochemiecs_CZ
dc.description.facultyFaculty of Scienceen_US
dc.description.facultyPřírodovědecká fakultacs_CZ
dc.identifier.repId74503
dc.title.translatedStudy of β-N-acetylhexosaminidase in tobacco plantsen_US
dc.contributor.refereeTichá, Marie
dc.identifier.aleph001274309
thesis.degree.nameBc.
thesis.degree.levelbakalářskécs_CZ
thesis.degree.disciplineBiochemiecs_CZ
thesis.degree.disciplineBiochemistryen_US
thesis.degree.programBiochemiecs_CZ
thesis.degree.programBiochemistryen_US
uk.thesis.typebakalářská prácecs_CZ
uk.taxonomy.organization-csPřírodovědecká fakulta::Katedra biochemiecs_CZ
uk.taxonomy.organization-enFaculty of Science::Department of Biochemistryen_US
uk.faculty-name.csPřírodovědecká fakultacs_CZ
uk.faculty-name.enFaculty of Scienceen_US
uk.faculty-abbr.csPřFcs_CZ
uk.degree-discipline.csBiochemiecs_CZ
uk.degree-discipline.enBiochemistryen_US
uk.degree-program.csBiochemiecs_CZ
uk.degree-program.enBiochemistryen_US
thesis.grade.csVýborněcs_CZ
thesis.grade.enExcellenten_US
uk.abstract.csβ-N-acetylhexosaminidasy jsou přítomny ve všech živých organismech, avšak informací o tomto enzymu v rostlinách a především listech je známo málo. V případě rostlinných β-N-acetylhexosaminidas se spekuluje o možné obranné funkci proti houbovým i jiným patogenům a také o degradaci zásobních glykoproteinů. Z listů tabáku (Nicotiana tabacum L.) byla precipitací síranem amonným, gelovou chromatografií na koloně Sephacrylu S-300 a afinitní chromatografií na koloně Con A-Sepharosy připravena β-N- acetylhexosaminidasa o specifické aktivitě 190 nmol min-1 mg-1 pro substrát p-NP-GlcNAc. Byla stanovena Michaelisova konstanta a maximální rychlost reakce β-N- acetylhexosaminidasy pro substrát p-NP-GlcNAc (Km = 0,33 mM a Vmax = 414 nmol min-1 mg-1 ). Pomocí kapilární elektroforézy bylo studováno štěpení diacetylchitobiosy β-N- acetylhexosaminidasou. Stanovená aktivita β-N-acetylhexosaminidasy pro diacetylchitobiosu byla více než jedenáctkrát nižší než v případě aktivity β-N-acetylhexosaminidasy pro substrát p-NP-GlcNAc. Z těchto výsledků lze usoudit, že chitobiosa, a pravděpodobně ani další chitooligomery, nejsou přirozeným substrátem β-N-acetylhexosaminidasy a tedy neslouží primárně k ochraně před houbovými patogeny. Přirozeným substrátem by mohly být spíše oligosacharidové řetězce glykoproteinů.cs_CZ
uk.abstract.enβ-N-acetylhexosaminidases are ubiquitous in all living organisms, but there is little information about these enzymes in plants, especially in leaves. Suggested functions of plant β-N-acetylhexosaminidases are participation in defence responses against fungal and other pathogens and also in degradation of storage glycoproteins. β-N-acetylhexosaminidase from tobacco leaves (Nicotiana tabacum L.) was purified to final specific activity 190 nmol min-1 mg-1 with p-NP-GlcNAc as substrate. Precipitation by ammonium sulphate, gel filtration chromatography on Sephacryl S-300 column and affinity chromatography on Con A- Sepharose column were used. Michaelis constant and maximal reaction rate of β-N- acetylhexosaminidases determined for p-NP-GlcNAc was 0.33 mM and 414 nmol min-1 mg-1 , respectively. The cleavage of diacetylchitobiose catalyzed by β-N-acetylhexosaminidase was studied using capillary electrophoresis. Determined activity of β-N-acetylhexosaminidase for diacetylchitobiose was more than 10-times lower compared to β-N-acetylhexosaminidase activity for p-NP-GlcNAc. These results indicate that chitobiose and probably other chitooligomers are not natural substrates of β-N-acetylhexosaminidase and thus this enzyme is most likely not involved in protection against fungal pathogens. Natural substrate...en_US
uk.publication.placePrahacs_CZ
uk.grantorUniverzita Karlova, Přírodovědecká fakulta, Katedra biochemiecs_CZ
dc.identifier.lisID990012743090106986


Files in this item

Thumbnail
Thumbnail
Thumbnail
Thumbnail
Thumbnail

This item appears in the following Collection(s)

Show simple item record


© 2017 Univerzita Karlova, Ústřední knihovna, Ovocný trh 560/5, 116 36 Praha 1; email: admin-repozitar [at] cuni.cz

Za dodržení všech ustanovení autorského zákona jsou zodpovědné jednotlivé složky Univerzity Karlovy. / Each constituent part of Charles University is responsible for adherence to all provisions of the copyright law.

Upozornění / Notice: Získané informace nemohou být použity k výdělečným účelům nebo vydávány za studijní, vědeckou nebo jinou tvůrčí činnost jiné osoby než autora. / Any retrieved information shall not be used for any commercial purposes or claimed as results of studying, scientific or any other creative activities of any person other than the author.

DSpace software copyright © 2002-2015  DuraSpace
Theme by 
@mire NV