Vliv imunologických faktorů na úspěšnost IVF/ET

Abstract

4 Abstrakt Cílem této práce bylo zjistit přítomnost receptorů (CD16, CD161, NKG2D, KIR2DL4 a CD85j) na povrchu imunokompetentních buněk, a zda má přítomnost těchto receptorů nějakou souvislost s úspěšností in vitro fertilizace (IVF) a následného embryotransferu (ET). Pozorovali jsme signifikantní rozdíl ve věku úspěšných proti neúspěšným pacientkám. Tento rozdíl pozorovaný v naší studii potvrzuje dříve studovaný jev závislosti věku na úspěšnosti IVF. Výsledek cytotoxické eseje nám potvrdil, že ani stimulační protokol, ani zdroj PBMC nemá vliv na cytotoxickou efektorovou funkci izolovaných buněk. Poté jsme provedli rozsáhlou analýzu povrchových znaků odlišných buněčných subpopulací. V první řadě bylo podstatné srovnání pacientek se zdravými dárkyněmi. Buňky nesoucí HLA-G vázající receptory KIR2DL4 i CD85j na které jsme se v této studii zaměřili, se u obou skupin pacientek vyskytují ve snížené míře. Dále jsme pozorovali rozdíly v expresi KIR2DL4 a CD85j na povrchu různých buněčných subpopulací (CD56+dim , CD56+bright , T buněk, cytotoxických T buněk)a v jejich zastoupení. Zde jsme pak pozorovali rozdíly v povrchové expresi CD56 na CD56+bright NK buňkách, výskyt CD56+dim NK buněk v PBMC (exprese CD16 na této subpopulaci), výskyt CD56+dim Další krokem bylo srovnání zastoupení buněčných subpopulací u úspěšných a...

5 Abstract The aim of this study was to evaluate the presence of receptors (CD16, CD161, NKG2D, KIR2DL4 and CD85j) on the surface of immunocompetent cells and whether their presence is involved in the in vitro fertilization (IVF) and following embryotransfer (ET) success. We observed significant difference in the age of successful versus unsuccessful patients, which is confirmed by former studies on age-dependence of IVF success. The result from cytotoxic assay confirmed, that neither the stimulation protocol, nor the PBMC source have any effect on effector function. Afterwards, we performed a large-scale analysis of surface markers, starting with healthy donors, compared to patients. Both groups of patients have lower counts of HLA-G binding KIR2DL4 or CD85j receptors bearing cells. Next we observed the expression of these two receptors on various subpopulations of cells (CD56+dim , CD56+bright , T helpers and cytotoxic T cells) and their counts. Here we observed differences in CD56 surface expression on CD56+ bright NK cells, the levels of CD56+dim NK cells in PBMC (CD16 expression on this population), levels of CD56+dim Next step was to compare the levels of cell populations between the successful and unsuccessful patients. We observed an increased surface expression of KIR2DL4 on lymphocytary PBMC of...