Separace stereoisomerů dimethylamylaminu pomocí kapilární elektroforézy

Abstract

Tato bakalářská práce se zaměřuje na vývoj a optimalizaci metody pro separaci stereoisomerů 1,3-dimethylamylaminu (DMAA), vyskytujícího se v přípravcích typu "pre-workout boosters", pomocí kapilární elektroforézy s bezkontaktní vodivostní detekcí, za účelem možného využití při posuzování jeho rostlinného či syntetického původu. DMAA je chirální primární alifatický amin obsahující dvě chirální centra, a tvoří tak dva páry enantiomerů, celkem čtyři stereoisomery. Rozdíly v zastoupení jednotlivých forem mohou sloužit k posouzení rostlinného či syntetického původu DMAA. V rámci vývoje metody byly testovány různé chirální selektory, z nichž jako nejvhodnější pro další optimalizaci byl zvolen taurodeoxycholát sodný, který jako jediný umožnil separaci píků až na základní linii. Výsledný základní elektrolyt byl tak složen z 15mM taurodeoxycholátu sodného a 20mM fosfátového pufru o pH 7,0 a bylo použito separační napětí 30 kV. Za těchto podmínek byly separovány dva píky, pravděpodobně odpovídající dvěma diastereoisomerním formám, zatímco enantiomery migrovaly společně. Vyvinutá metoda by mohla nalézt využití při prvotním screeningu původu DMAA na základě poměru zastoupení těchto forem. Lineární závislost plochy píku byla pozorována při koncentracích 0,01-0,2 mg ml-1 s R2 vyšší nebo rovno 0,9996....

This bachelor's thesis focuses on the development and optimisation of a method for the separation of stereoisomers of 1,3-dimethylamylamine (DMAA), found in "pre-workout booster" products, using capillary electrophoresis with contactless conductivity detection for its possible use in evaluating the plant or synthetic origin of DMAA. DMAA is a chiral primary aliphatic amine containing two chiral centres and therefore forms two pairs of enantiomers, i.e. four stereoisomers in total. Differences in the ratios of the individual forms may be used to evaluate the plant or synthetic origin of DMAA. During method development, different chiral selectors were tested, of which sodium taurodeoxycholate was selected as the most suitable for further optimisation, as it was the only one that enabled baseline separation of the peaks. The final background electrolyte consisted of 15 mM sodium taurodeoxycholate and 20 mM phosphate buffer at pH 7.0, and a separation voltage of 30 kV was used. Under these conditions, two peaks were separated, probably corresponding to two diastereomeric forms, while the enantiomers migrated together. The developed method could therefore be used for the initial screening of DMAA origin based on the ratio of these forms. A linear relationship between peak area and DMAA concentration was...