Konjugáty protilátka-polymer-léčivo jako systémy pro léčbu nádorových onemocnění

Abstract

Tato bakalářská práce se zabývá přípravou a in vitro hodnocením konjugátů proti- látka-polymer-léčivo (APDC) cílených na folátový receptor 1 (FOLR1), který je nad- měrně exprimován u řady karcinomů. Připravené systémy se skládají z monoklonální protilátky mirvetuximab, nebo kontrolní protilátky flebogamma, hydrofilního kopoly- merního nosiče na bázi N-(2-hydroxypropyl)methakrylamidu (HPMA) nebo N-(1,3- dihydroxyprop-2-yl)methakrylamidu (DHPMA) a z vysoce cytotoxického léčiva mo- nomethyl auristatinu E (MMAE). Syntéza polymerních nosičů probíhala pomocí RAFT polymerace. Na tyto nosiče bylo následně přes enzymaticky štěpitelnou spojku (Val- Cit-PAB) navázáno léčivo v různém hmotnostním zastoupení (10 % a 20 %). Finální APDC systémy vznikly konjugací polymerních prekurzorů s redukovanými protilát- kami prostřednictvím maleimidových skupin. Všechny meziprodukty i výsledné kon- jugáty byly charakterizovány pomocí chromatografických metod a UV/VIS spektro- fotometrie. V závěru práce byla otestována cytotoxicita připravených APDC systémů na in vitro modelech pomocí PrestoBlue testu na buněčných liniích s vysokou (JAR) a nízkou (2102Ep) expresí FOLR1. Výsledné APDC s mirvetuximabem prokázaly spe- cifické směrování a účinnost proti FOLR1 nádorovým liniím, a mohou být dále testo-...

This bachelor thesis deals with the preparation and in vitro evaluation of antibody- polymer-drug conjugates (APDCs) targeting folate receptor 1 (FOLR1), which is ove- rexpressed in a number of carcinomas. The prepared systems consist of the monoclo- nal antibody mirvetuximab, or the control antibody flebogamma, a hydrophilic co- polymer carrier based on N-(2-hydroxypropyl)methacrylamide (HPMA) or N-(1,3- dihydroxyprop-2-yl)methacrylamide (DHPMA), and the highly cytotoxic drug mono- methyl auristatin E (MMAE). The synthesis of the polymer carriers was performed using RAFT polymerization. The drug was subsequently attached to these carriers via an enzymatically cleavable linker (Val-Cit-PAB) at different weight percentages (10 % and 20 %). The final APDC systems were formed by conjugating the polymer precur- sors with reduced antibodies via maleimide groups. All intermediates and final conju- gates were characterized using chromatographic methods and UV/VIS spectrophoto- metry. Finally, the cytotoxicity of the prepared APDC systems was tested on in vitro models using the PrestoBlue assay on cell lines with high (JAR) and low (2102Ep) FOLR1 expression. The resulting APDCs with mirvetuximab demonstrated specific targeting and efficacy against FOLR1 tumor cell lines, and can be further evaluated, e.g.,...