Vývoj chromatografické metody pro stanovení venlafaxinu a jeho metabolitu

Abstract

Venlafaxine and its biologically active metabolite O-desmethylvenlafaxine are among the most frequently prescribed antidepressants. However, their problem lies in low biodegradability, causing these antidepressants to enter wastewater and subsequently surface waters. The concentrations of both substances in surface waters are steadily increasing and have already begun to negatively affect aquatic organisms. For this reason, a UHPLC method was developed for their determination as part of a bachelor's thesis. The measurements were carried out in reversed-phase mode on a Kinetex C18 chromatography column measuring 100 x 2.1 mm, with a particle size of 1,7 µm and a pore size of 100 Å.Amobile phase composed of a mixture of deionized water and acetonitrile modified with formic acid was used for the analysis. The method used gradient elution with an acetonitrile fraction ranging from 10 to 50 % (vol.). The developed method was successfully validated for precision, linearity, limit of detection, and limit of quantitation. The method was subsequently applied to the quality control of a commercial pharmaceutical product containing venlafaxine. Keywords UHPLC, validation, antidepressants, venlafaxine, desvenlafaxine

Venlafaxin a jeho biologicky aktivní metabolit O-desmethylvenlafaxin patří mezi velmi často předepisovaná antidepresiva. Jejich problémem je ale nízká biologická odbouratelnost, kvůli které se tato antidepresiva dostávají do odpadních a následně i povrchových vod. Koncentrace obou látek v povrchových vodách stále stoupá a již začala negativně ovlivňovat vodní organismy. Z tohoto důvodu byla v rámci bakalářské práce vyvinuta UHPLC metoda pro jejich stanovení. Měření probíhalo na reverzní fázi pomocí chromatografické kolony Kinetex C18 s rozměry 100 x 2,1 mm, průměrem částic 1,7 µm a velikostí pórů 100 Å. K analýze byla použita mobilní fáze složená ze směsi deionizované vody a acetonitrilu modifikované kyselinou mravenčí. Metoda využívala gradientovou eluci s podílem acetonitrilové složky v rozmezí 10-50 % (obj.). U vyvinuté metody byla provedena úspěšná validace přesnosti, linearity, meze detekce a meze stanovitelnosti. Metodou byla následně provedena kontrola kvality komerčního léčivého přípravku obsahujícího venlafaxin. Klíčová slova UHPLC, validace, antidepresiva, venlafaxin, desvenlafaxin