Characterization of new tools for studying the autoimmune regulator function and molecular properties

Abstract

(CZ) Autoimunitní polyendokrinní syndrom typu 1 (APS-1) je vzácné a závažné autoimunitní onemocnění způsobené mutacemi vedoucím ke ztrátě funkce genu autoimunitního regulátoru (AIRE). Aire je primárně exprimován v medulárních epiteliálních buňkách v thymu (mTECs), kde řídí navození centrální imunitní tolerance. Kromě toho je Aire také produkován v extrathymických buňkách exprimujících Aire (eTACs) nacházejících se v sekundárních lymfoidních orgánech, kde je nezbytný pro indukci TH17 imunitní odpovědi proti kvasince Candida albicans. Prevalence chronické mukokutánní kandidózy (CMC) u pacientů s APS-1 se liší v závislosti na specifické AIRE mutaci, což naznačuje, že pro antimykotickou imunitu jsou důležité určité AIRE domény nebo jeho molekulární vlastnosti. Nástroje a přístupy potřebné ke studiu extrathymické funkce Aire in vivo na molekulární úrovni jsou však stále velmi omezené. V této práci jsem charakterizovala nově vytvořený reportérový myší kmen AireP2A*ZsGreen a následně navrhla experimenty, ve kterých by mohl být využit. Také jsem vytvořila izolační strategii pro buňky eTACs, založenou na povrchových markerech identifikovaných pomocí dat z profilování RNA na úrovni jednotlivých buněk, což umožňuje jejich izolaci z myších kmenů bez reportérových alel. Nakonec jsem zhodnotila vliv mutací Aire...