Development of a Universal Sensor for Synthetic Opioids.

Abstract

Od roku 2012 se objevilo mnoho nových syntetických opioidů - zejména derivátů fentanylu a benzimidazolu; i drobné změny ve struktuře mohou výrazně zvýšit jejich účinnost a toxicitu, což představuje závažné riziko. V roce 2020 tvořily syntetické opioidy 82 % z přibližně 70 000 úmrtí na předávkování v USA. Současné detekční metody založené na imunochemických esejích jsou omezeny na známé sloučeniny, což ztěžuje identifikaci nových analogů. Tato bakalářská práce se zabývá vývojem univerzálního senzoru pro syntetické opioidy. Metoda je založena na principu kompetitivního (displacement) eseje, při němž je μ-opioidní receptor označen fluorescenčním ligandem, který je v přítomnosti konkurenčního opioidu vytěsněn. Fluorescenční ligand byl připraven konjugací naltrexonu s fluoresceinem. μ-opioidní receptor byl úspěšně exprimován v buňkách HEK293 a kompetitivní vazba ligandů byla testována v živých buňkách. Dále byly membránové proteiny izolovány ve formě nanodisků a byly provedeny pokusy o afinitní obohacení μ-opioidních receptorů pomocí selektivních protilátek nebo na pevné fázi imobilizovaného naltrexonového ligandu. Tyto předběžné experimenty poslouží pro další rozvoj metody.