Vliv morfinu na β-amyloidem vyvolanou aktivaci buněk mikrogliální C8-B4 linie

Abstract

Alzheimer's disease is a progressive neurodegenerative disorder, the pathogenesis of which is closely linked to chronic neuroinflammation. The accumulation of pathological β- amyloid in brain tissue triggers activation of microglia, leading to the production of neurotoxic and pro-inflammatory mediators. The aging population, which has the highest incidence of the disease, also frequently suffers from chronic pain that is clinically managed with opioid analgesics. However, previous studies suggest that opioids can modulate the function of the neuroimmune system. Therefore, it is crucial to understand the impact of opioids on the inflammatory response of microglia that are already primed or activated by amyloid pathology. This thesis focuses on investigating the interaction between morphine and β-amyloid during microglial activation in a C8-B4 cell line in vitro model. In our model, cells were first primed with β-amyloid and subsequently exposed to morphine. The experimental part evaluates not only changes at the protein level-specifically the expression of key pro-inflammatory cytokines and selected surface receptors associated with microglial activation-but also includes the assessment of other cellular and functional parameters. Using cell viability assays, measurements of ATP production, reactive...

Alzheimerova choroba je progresivní neurodegenerativní onemocnění, jehož patogeneze je úzce spjata s chronickým neurozánětem. Akumulace patologického β-amyloidu v mozkové tkáni spouští masivní aktivaci mikroglií, což vede k produkci neurotoxických a prozánětlivých mediátorů. Stárnoucí populace, u níž je incidence nejvyšší, zároveň často trpí chronickými bolestmi, které jsou v klinické praxi tlumeny pomocí opioidních analgetik. Předchozí studie ovšem naznačují, že opioidy mohou modulovat funkci neuroimunitního systému. Je proto klíčové pochopit, jaký vliv má přítomnost opioidů na zánětlivou odpověď mikroglií, které jsou již primovány či aktivovány amyloidní patologií. Tato diplomová práce se zaměřuje na zkoumání interakce mezi morfinem a β-amyloidem při aktivaci mikroglií v in vitro modelu, konkrétně buněčné linie C8-B4. V našem modelu byly buňky nejprve primovány β-amyloidem a následně byly vystaveny působení morfinu. Experimentální část hodnotí nejen změny na proteinové úrovni, konkrétně expresi klíčových prozánětlivých cytokinů a vybraných povrchových receptorů spojených s mikrogliální aktivací, ale zahrnuje i hodnocení dalších buněčných a funkčních parametrů. Pomocí testů buněčné životaschopnosti, měření tvorby ATP mitochondriemi vs glykolýzou, produkce kyslíkových radikálů a změny...