Vliv směsí doplňků stravy s kurkuminem na aktivitu cytochromu P450 2C9

Abstract

Curcumin, the dominant curcuminoid in Curcuma longa, is a widely used dietary supplement due to its beneficial effects on human health. However, its therapeutic use is limited by its low stability under physiological conditions and its inhibitory effect on cytochromes P450, including the CYP2C9 isoform, which is localized primarily in the liver and to a lesser extent in the gastrointestinal tract, where it contributes to the oxidative metabolism of approximately 20% of drugs undergoing first-pass biotransformation. The aim of this bachelor's thesis was to investigate the effect of curcumin and its mixtures with zinc ions, vitamin C, or their combinations on the activity of CYP2C9 and the orthologous rat isoform CYP2C6 in vitro. Using microsomes from the livers of rats premedicated with phenobarbital as a source of enzymes, the conditions for measuring the demethylation of 7-methoxy-4 (trifluoromethyl)coumarin, which were first used to determine the effect of curcumin and its mixtures with dietary supplements on cytochrome P450 activity in the aforementioned microsomes. It was found that at the selected concentration of 10 μM curcumin, approximately 50% inhibition of CYP activity occurs. After a 30-minute preincubation of curcumin at 37 řC and pH 7.4 prior to addition to the reaction mixture, the...

Kurkumin, dominantní kurkuminoid rostliny Curcuma longa, je hojně využívaným doplňkem stravy pro své příznivé účinky na lidské zdraví. Jeho terapeutické využití je však limitováno nízkou stabilitou za fyziologických podmínek a inhibičním působením na cytochromy P450, mimo jiné i izoformu CYP2C9, která je lokalizována převážně v játrech a v menší míře v gastrointestinálním traktu, kde se podílí na oxidačním metabolismu přibližně 20 % léčiv procházejících první fází biotransformace. Cílem této bakalářské práce bylo sledovat vliv kurkuminu a jeho směsí se zinečnatými ionty, vitaminem C nebo jejich kombinací na aktivitu CYP2C9 a orthologní potkaní izoformy CYP2C6 in vitro. Za použití mikrosomů z jater potkanů premedikovaných fenobarbitalem jako zdroje enzymů byly optimalizovány podmínky měření demethylace 7-methoxy-4-(trifluoromethyl)kumarinu, které byly nejprve využity ke stanovení vlivu kurkuminu a jeho směsí s doplňky stravy na aktivitu cytochromů P450 v uvedených mikrosomech. Bylo zjištěno, že při zvolené koncentraci 10μM kurkuminu dochází k přibližně 50% inhibici aktivity CYP. Po 30min preinkubaci kurkuminu při 37 řC a pH 7,4 před přidáním do reakční směsi dochází ke snížení inhibičního vlivu kurkuminu na reakci, což by mohlo být důsledkem jeho částečné degradace za těchto podmínek. Přítomnost...