Specifická post-vakcinační imunitní odpověď proti virovým antigenům u imunokompromitovaných pacientů

Abstract

Vaccination is a key tool for the prevention of infectious diseases; however, its effectiveness in immunocompromised patients is often reduced and cannot be reliably assessed using serological markers alone. In lung transplant recipients (LTRs), long-term immunosuppressive therapy leads to impaired antibody production. This raises the question whether vaccine-induced immune responses can be adequately evaluated without considering the cellular component. The aim of this thesis was to characterize virus-specific T cell responses in LTRs following RSV vaccination using a combination of functional and molecular approaches. Peripheral blood mononuclear cells (PBMCs) obtained from LTRs (n=6) post vaccination were stimulated with viral peptides, virus-specific T cells were subsequently sorted based on cytokine production and their T cell receptor beta-chain (TRB) repertoire sequenced. In total, 24 RSV-associated and 87 CMV-associated clonotypes exceeding 1% abundance were identified. Deep T cell immunophenotyping of samples obtained from of LTRs prior vaccination (n=11) revealed increased activation of CD8+ central memory T cells measured by HLA-DR expression in samples from LTRs who developed at least 2-fold increase in RSV-specific IgG (n=7) compared to non-responding LTRs (n=4). Moreover, TEMRA CD8+ T...

Vakcinace představuje klíčový nástroj v prevenci infekčních onemocnění. Její účinnost u imunokompromitovaných pacientů je však často snížená a nelze ji spolehlivě hodnotit pouze na základě sérologických markerů. U pacientů po transplantaci plic (LTRs) vede dlouhodobá imunosupresivní terapie ke zhoršené produkci protilátek. Nabízí se proto otázka, zda lze imunitní odpověď po vakcinaci hodnotit bez zohlednění buněčné složky. Cílem této práce bylo charakterizovat virus-specifickou T buněčnou odpověď u LTRs po vakcinaci proti RSV s využitím kombinace funkčních a molekulárních přístupů. Mononukleární buňky periferní krve (PBMC), získané od LTRs (n=6) po vakcinaci, byly stimulovány virovými peptidy. Virus-specifické T buňky byly poté sortovány na základě produkce cytokinů a následně u nich bylo provedeno sekvenování repertoárů beta řetězce T buněčného receptoru (TRB). Dohromady se podařilo identifikovat 24 RSV-asociovaných a 87 CMV-asociovaných klonotypů s frekvencí přesahující 1%. Podrobná imunofenotypizace T buněk získaných od LTRs před vakcinací (n=11) poukázala na vyšší aktivaci centrálně paměťových CD8+ T buněk ve vzorcích LTRs, kteří vyvinuli alespoň dvojnásobný nárust produkce RSV- specifických IgG protilátek (n=7), díky vyšší expresi HLA-DR v porovnání se vzorky LTRs, kteří na vakcinaci...