Úloha miR-24-3p v apoptóze neurálních kmenových buněk

Abstract

Apoptosis is one of the best-known processes of programmed cell death. It is a complex and tightly regulated process that is essential for normal cell renewal, aging or embryonic development. Complications arise when the regulation of apoptosis is disrupted or stopped. Disturbances in apoptosis are an underlying factor in many neurodegenerative, autoimmune and cancer diseases. MicroRNAs (miRNAs) are small non-coding RNA molecules that function as important post-transcriptional regulators of gene expression due to their ability to bind to the 3'UTR region of mRNA. MicroRNAs serve as important regulators in virtually every pathophysiological process, including programmed cell death. Because apoptosis is a very complex molecular mechanism, a number of miRNAs have been proposed to promote or inhibit it. The aim of this study is to investigate the role of miR-24- 3p in regulating the apoptotic processes in neural stem cells in vitro. A cellular model developed in our laboratory will be used to induce apoptosis. The cell death processes will be modulated using a synthetic miRNA inhibitor and a mimetic. Changes in the expression of proapoptotic and antiapoptotic proteins will be monitored by Western blot. Furthermore, an analysis of cellular metabolic activity under conditions of oxidative stress and...

Apoptóza je jedním z nejznámějších procesů programované buněčné smrti. Jde o komplexní a přísně regulovaný proces, který je nezbytný pro normální obnovu buněk, stárnutí nebo embryonální vývoj. Komplikace nastávají v případech, kdy je narušena nebo zastavena regulace apoptózy. Poruchy apoptózy jsou základním faktorem mnoha neurodegenerativních, autoimunitních a nádorových onemocnění. MikroRNA (miRNA) jsou malé nekódující molekuly RNA, které fungují jako důležité post-transkripční regulátory genové exprese díky své schopnosti vázat se na 3'UTR oblast mRNA. MikroRNA slouží jako důležité regulátory prakticky v každém patofyziologickém procesu, včetně programované buněčné smrti. Protože apoptóza je velmi složitý molekulární mechanismus, byla navržena řada miRNA, které ji podporují nebo inhibují. Cílem této práce je zjistit roli miR-24-3p v apoptotických procesech v neurálních kmenových buňkách in vitro. K indukci apoptózy bude použit buněčný model vyvinutý v naší laboratoři. Procesy buněčné smrti budou modulovány pomocí syntetického miRNA inhibitoru a mimetika. Změny v expresi proapoptotických a antiapoptotických proteinů budou sledovány pomocí metody Western blotu. Dále bude provedena analýza metabolické aktivity buněk v podmínkách oxidativního stresu a imunocytochemického barvení markerů neurálních...